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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-CCDC144NL
中文名称 卷曲螺旋结构域蛋白144NL抗体规格
别 名 Coiled coil domain containing 144 family, N terminal like; MGC87631; Putative coiled coil domain containing protein 144 N terminal-like; C144L_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 24kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from Human CCDC144NL
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
血红蛋白θ1(HBθ1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)永生化人鼻咽上皮茯苓表告依春
血红蛋白β(HBβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)转S9基因仓鼠卵巢闪光须霉麦冬
磷脂爬行酶5(PLSCR5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)仓鼠肺米曲霉丁香叶
糖蛋白M6B(GPM6B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠肾系膜谷氨酸棒杆菌石吊兰
嗅素2(OLFM2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)分泌A2抗体B淋巴香草兰根疾布洛芬
嗅素1(OLFM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠皮肤鞘氨单胞菌属枸橼酸
突触蛋白Ⅱ(SYN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾系葡萄座腔菌氨苯蝶啶
突触蛋白Ⅲ(SYN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)猴肾系苏云金芽胞杆菌库尔斯塔克亚种苄氨酸
尿皮质素3(UCN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)猪肾传代系Marivirga tractuosa卡维地洛
斜方蛋白1(RHOM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)草鱼肾脏蜡状芽孢杆菌盐酸赛洛唑啉
核糖核酸外切酶1(ERI1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)团头鲂尾鳍食树脂新鞘氨菌小鼠转化生长因子α(TGF-α)Elisa测定试剂盒
核糖核酸酶K(RNASEK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)白鲢尾鳍光孢黄丛枝珊瑚菌转录因子E2F-1抗体流式免疫组化
5'-3'外切核糖核酸酶1(XRN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)鲑鱼胚胎约利曼漆斑菌抗“衰老关键蛋白"抗体流式免疫组化anti-Fibulin 1
5'-3'外切核糖核酸酶2(XRN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)草鱼胚胎金黄色葡萄球菌金黄亚种葡萄糖转运蛋白2抗体流式免疫组化
核糖核酸酶A2(RNASE2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)草鱼吻皮Pseudarthrobacter层粘蛋白α5抗体流式免疫组化
卷曲螺旋结构域蛋白144NL抗体规格大鼠低密度脂蛋白(VLDL)酶联免疫吸附测定试剂盒人非小肺癌 -荧光素酶标记Anti-GLUT1/FITC 荧光素标记葡萄糖转运蛋白1抗体IgG
大鼠山梨脱氢酶(SDH)酶联免疫吸附测定试剂盒大鼠胶质瘤-荧光素酶标记Anti-GLUT2/FITC 荧光素标记葡萄糖转运蛋白2抗体IgG
大鼠凝血酶原片段F1+2(F1+2)酶联免疫吸附测定试剂盒人胃癌顺铂耐药株Anti-GLUT3/FITC 荧光素标记葡萄糖转运蛋白3抗体IgG
大鼠血管舒张剂激活磷蛋白(VASP)酶联免疫吸附测定试剂盒人顺铂耐药株Anti-GLUT4/FITC 荧光素标记葡萄糖转运蛋白4抗体IgG
大鼠DNA甲基转移酶3A(DNMT3A)酶联免疫吸附测定试剂盒人肺腺癌顺铂耐药性Anti-GLUT12/slc2a12/FITC 荧光素标记葡萄糖转运蛋白12抗体IgG
大鼠血管粘附蛋白1(VAP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒人卵巢癌耐DDP,2mmol/LAnti-Glycoprotein /FITC 荧光素标记风疹病糖蛋白抗体IgG
大鼠载脂蛋白A1 (ApoA1) 酶联免疫吸附测定试剂盒大鼠心肌Anti-glypican 1/FITC 荧光素标记磷脂酰基蛋白聚糖-1抗体IgG
大鼠异柠檬酸脱氢酶 (ICD) 酶联免疫吸附测定试剂盒小鼠腹水瘤Anti-Glypican 4/FITC 荧光素标记磷脂酰基蛋白聚糖-4抗体IgG