组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
1,2,4,5-四(NMR定量标准品,99.8%(GC))Acetyl-Histone H2A (Lys5) Antibody2-氟-溴

熔点标准品(+235 to +237℃)Phospho-Histone H2A.X (Ser139) Antibody2-基-4'-甲基联

1,(标准品)Phospho-Histone H2A.X (Ser139) Antibody1-Boc-羟甲基吡咯烷

二硫化四甲基秋兰姆(标准品)Histone H2A Antibody II()戊二酸单酰

正己烷标准溶液(1000μg/ml,基体：甲)GIRK2 (D6C2T) Rabbit mAb2-氟-吡啶

顺式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六酸(标准品)Ribosomal Proin S3 Antibody(2R)-(-)-缩水甘油基对甲磺酸酯

二甲硝咪唑(标准品)MAGE-A3 Antibody4,6-二甲氧基-2-甲磺酰基嘧啶

N-(2-羟基)二-N,N′,N′-三酸 三钠盐 溶液(~41% in H2O (T))Keratin 5 (D4U8Q) Rabbit mAb4,4'-二甲基-2,2'-联吡啶

青霉素V(标准品)Phospho-Stat1 (Tyr701) (D4A7) Rabbit mAb (PE Conjuga)2,二氟苄基溴

2-NP-AOZ(标准品)Phospho-IRS-1 (Ser332/336) Antibody基甲酸甲酯

磺醋酰(标准品)Phospho-PP1α (Thr320) Antibody3,二氟肉桂酸

磺喹噁啉(标准品)SPAR (D9P9T) Rabbit mAb甲酸酯

磺吡(标准品)PP1α Antibody硫酸阿托品

泰妙菌素(标准品)GLI2 (R770) Antibody2,5-二对二甲

甲酸铵(用于质谱,≥99.0%)IGFBP3 (D1U9C) Rabbit mAb2-溴噻唑-甲酸酯

甲(色谱级, ≥99.5%(GC))PCNA (PC10) Mouse mAb2-羟基-甲基吡啶

甲基叔丁基(农残级,≥99.9%(GC）)PCNA (PC10) Mouse mAb二氨基蓝 BB

甲基叔丁基(GC,≥99.9%(GC))TORC1/CRTC1 (C71D11) Rabbit mAb茉莉酸

B细胞活化因子(BAFF)ELISA试剂盒MuRF1/Trim63  肌肉细胞特异性泛素蛋白连接酶1100 ul

B细胞κ 轻肽基因增强子核因子抑制因子ε(NFKBIE)ELISA试剂盒MyD88  髓样分化蛋白20 ul

B群链球菌多糖(IgG)ELISA试剂盒NIPP1/ARD1  核抑制蛋白酸酶1100 ul

B-淋巴细胞趋化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA试剂盒Myelin Proin Zero   外周髓脂P0蛋白/P0蛋白100 ul

B淋巴细胞抗原(CD20)ELISA试剂盒PMP2  周围神经髓鞘蛋白2100 ul

blca-4 ELISA试剂盒MYSM1  MYSM1100 ul

blca-1 ELISA试剂盒MYOZ/MYOZ1  MYOZ100 ul

Bcl-2样蛋白1(BCL2L1)ELISA试剂盒MyoD1/Myf3  肌原调节蛋白100 ul

B7-H4 ELISA试剂盒SM Myosin (Smooth Muscle)  心肌肌凝蛋白(平滑肌) 单抗20 ul
小反刍兽RT-PCR检测试剂盒厂家骨涎蛋白Chrysosplel D中文名：猫眼草酚别名：分子式：C18H16O8

脑和急性白血病胞浆蛋白抗体Sepil中文名：别名：分子式：C16H14O7

骨髓基质干细胞抗原2抗体Fustin中文名：黄颜木素别名：Dihydrofisetin分子式：C15H12O6

环指蛋白47抗体Hydroxygenkwanin中文名：羟基芫花素别名：7-O-Methylluteolin分子式：C16H12O6

BEN结构域蛋白5抗体Dihydrorobinetin中文名：别名：分子式：C15H12O7