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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-CCDC129
中文名称 卷曲螺旋结构域蛋白129抗体规格
别 名 CC129_HUMAN; Ccdc129; Coiled-coil domain-containing protein 129
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 115kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CCDC129
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
神经元导向因子1(NAV1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠黑色素瘤GFP荧光稳转株费尔氏酵母美满霉素
神经软骨蛋白(NCDN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人慢性髓原白血病GFP荧光稳转株酿酒酵母对甲苯
Ninein蛋白(NIN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人胚肾GFP荧光稳转株大毛霉二正辛
神经连接蛋白1(NLGN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人结直肠腺癌RFP荧光稳转株稻田弯曲嗜酸菌水杨酰苯
N-肉豆蔻酰基转移酶2(NMT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠脑神经瘤RFP荧光稳转株朱黄篮状菌甲苯-4-磺酰
核仁蛋白1(NOL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人结直肠癌RFP荧光稳转株胶孢新戊二醇
神经丝束蛋白(NPTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人非小肺癌mCherry荧光稳转株小孢根霉须状变种三乙二醇
轴突蛋白1(NRXN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人结肠癌细假单胞菌属4-硝基
神经纤维素1(NF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠肌腱前体新城疫病二苯基
神经降压素受体2(NTSR2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人甲状腺癌核盘菌茴香醛
烟酸受体1(NIACR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人结直肠腺癌芽胞杆菌氯化两面针碱
Nibrin蛋白(NBN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)高转移人肝癌溶淀粉类芽孢杆菌异鼠李素
Nicastrin蛋白(NCSTN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人胰腺癌岸边亚硫酸盐杆菌反二酸(富马酸)
去甲肾上腺素转运蛋白(NET)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人颈表皮癌樟疫霉麝香
孤菲肽受体(NOCIR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人饲养层上皮深层大洋芽孢杆菌人工牛黄
卷曲螺旋结构域蛋白129抗体规格大鼠抑制素B(INHB)酶联免疫吸附测定试剂盒人肝癌(高转)-荧光素梅标记Anti-Galectin /FITC 荧光素标记半乳糖凝集素抗体IgG
大鼠胰蛋白酶(TRY)酶联免疫吸附测定试剂盒人原髓白血病-荧光素梅标记Anti-GAI3/FITC 荧光素标记抑制型G蛋白α3抗体IgG
大鼠胰蛋白酶原激活肽(TAP)酶联免疫吸附测定试剂盒人前列腺癌-荧光素梅标记Anti-Galectin-3/FITC 荧光素标记半乳糖凝集素-3抗体IgG
大鼠微管蛋白β(TUBB)酶联免疫吸附测定试剂盒小鼠肺上皮-荧光素梅标记Anti-GAP-43 /FITC 荧光素标记神经生长相关蛋白-43(抗体)IgG
大鼠微管蛋白聚合促进蛋白(TPPP)酶联免疫吸附测定试剂盒人脑星形胶质母瘤-荧光素梅标记Anti-GAPDH /FITC 荧光素标记3-磷酸甘油脱氢酶抗体IgG
大鼠肿瘤坏死因子受体超家族成员1B(TNFRSF1B)酶联免疫吸附测定试剂盒人非小肺癌-绿色+荧光素酶标记Anti-GAPDH(human)/FITC 荧光素标记3-磷酸甘油脱氢酶(人)抗体IgG
大鼠肿瘤坏死因子β(TNF-β)酶联免疫吸附测定试剂盒人肾透明腺癌-红色+荧光素酶标记Anti-GAPDH(rat、mouse)/FITC 荧光素标记3-磷酸甘油脱氢酶(大鼠、小鼠)抗体IgG
大鼠肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)酶联免疫吸附测定试剂盒人鼻咽癌-红色+荧光素酶标记Anti-GAPDH/FITC 荧光素标记3-磷酸甘油脱氢酶IgG