详情介绍
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-CCDC157
中文名称 卷曲螺旋结构域蛋白157抗体说明书
别 名 CCDC 157; Coiled coil domain containing 157; Coiled coil domain containing protein 157; coiled-coil domain-containing protein 157; KIAA1656; CC157_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 84kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CCDC157
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
融合蛋白(FUS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾;BS-C-1多分枝灵芝格列美脲
7-脱氢胆固还原酶(DHCR7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾(SV40转化);COS-1 [COS1]植物乳杆菌人尿嘧啶核苷磷酸化酶1(UPP1)Elisa测定试剂盒
氨基酰化酶1(ACY1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)SV40转化的非洲绿猴肾;COS-7美澳型核果褐腐病菌王不留行探针法PCR鉴定试剂盒
内收蛋白1(ADD1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾;VERO犁黑轮斑交链孢霉小鼠转铁蛋白受体(TFR/CD71)Elisa测定试剂盒
腺苷激酶(ADK)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)猴胚胎肾上皮Marc-145悬浮适应株;季也蒙迈耶氏酵母大鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL-1sRⅠ)Elisa测定试剂盒
腺苷酸激酶2(AK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)猴胎肾;MARC145/Gal-10空肠弯曲杆菌猪Bcl-2相关X蛋白(BAX)Elisa测定试剂盒
无羊膜蛋白(AMN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)猴胎肾;MARC145/Gal-8宇佐美曲霉成纤维生长因子受体3抗体流式免疫组化
血管抑素结合蛋白(AMOT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾系/HCV-NS5B;Vero-HCV-NS5B贝氏葡萄座腔菌整合素α4β7抗体流式免疫组化
Attractin蛋白(ATRN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A类产碱假单胞菌基质金属蛋白酶-9抗体流式免疫组化
失调蛋白2(ATXN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾系/HCV-NS4B;Vero-HCV-NS4B酿酒酵母NADPH氧化酶4抗体流式免疫组化
抗酶抑制因子1(AZIN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾系/HCV-NS4A;Vero-HCV-NS4A居海绵溶杆菌磷酸二酯酶4D抗体流式免疫组化
Aprataxin蛋白(APTX)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3毛柄金钱菌(金针菇)L-丙氨酸,α-氨基丙酸
天冬酰氨基葡萄糖酶(AGA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾系/HCV-NS2;Vero-HCV-NS2黄色孢链霉菌L-天门冬氨酸钾
B-淋巴瘤因子10(Bcl10)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾系/HCV-p7;Vero-HCV-p7总状共头霉DL-异亮氨酸
碱核蛋白1(BNC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)非洲绿猴肾系/HCV-E2;Vero-HCV-E2环圈链霉菌L-赖氨酸L-谷氨酸盐
卷曲螺旋结构域蛋白157抗体说明书大鼠甲状腺球蛋白(TG)酶联免疫吸附测定试剂盒小鼠诱导型多能干Anti-FOSL2/FITC 荧光素标记兔抗FOSL2抗体IgG
大鼠组蛋白脱乙酰基酶(HDAC2)酶联免疫吸附测定试剂盒昆明白小鼠胚胎成纤维,经mitomycin-C处理,P3,300万Anti-FOXJ1/HFH-4/FITC 荧光素标记抗插头蛋白J1抗体IgG
大鼠磷脂酰肌蛋白聚糖3(GPC3)酶联免疫吸附测定试剂盒 昆明白小鼠胚胎成纤维,经射线处理,P3,300万Anti-FOXO1/FOXO1A/FITC 荧光素标记叉头转录因子O1抗体IgG
大鼠组蛋白脱乙酰基酶1(HDAC1)酶联免疫吸附测定试剂盒人胚胎干H1无饲养层Anti-Phospho-FoxO1 (Thr24)/FoxO3a (Thr32) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠叉头蛋白家族抗体IgG
大鼠促甲状腺素(TSH)酶联免疫吸附测定试剂盒人胚胎干H9无饲养层Anti-Phospho-FoxO1 (Ser319) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠叉头蛋白家族1抗体IgG
大鼠III型胶原α1(COL3α1)酶联免疫吸附测定试剂盒 人肺癌Anti-Phospho-FoxO1 (Ser256) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠叉头蛋白家族1抗体IgG
大鼠促甲状腺胚胎因子(TEF)酶联免疫吸附测定试剂盒人胚胎心脏成纤维样Anti-FOXO3A/FITC 荧光素标记转录因子FOXO3A抗体IgG
大鼠促甲状腺素释放激素(TRH)酶联免疫吸附测定试剂盒人胚肺成纤维样(男)Anti-Phospho-FoxO3a (Ser318/321) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠叉头蛋白3A抗体IgG