组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
枸櫞酸奧芬那君;枸酸芬那君4E-BP1 (53H11) Rabbit mAb (PE Conjuga)轮环藤宁

β-半糖苷酶Notch1 (5B5) Rat mAb12-冠-4

脱落酸(标准品)TDP43 (G400) Antibody甲基硫代磺酸甲酯

脱落酸(高纯)p70 S6 Kinase MCF7 Control Cell Extracts1,2,3,四氢-2-萘

脱落酸,S-诱抗素; 壮芽灵TDP43 (A260) Antibody3,5-二羟基甲

胃蛋白酶(1:3000)PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAb三银

核糖核酸酶A(sigma)PSD95 (D27E11) XP® Rabbit mAb溴吡啶甲酸甲酯

S-4MLANA/MART-1 Antibody5-溴烟酸甲酯

胃蛋白酶(1:12000)Phospho-μ-Opioid Receptor (Ser375) Antibody伯吉斯试剂

蛋白酶K(进分)Rabbit IgG Isotype Control (Alexa Fluor® 647 Conjuga)哌啶甲酸甲酯

蛋白酶K(Sigma)Phospho-Doublecortin (Ser334) Antibody3,5-二溴-羟基甲

胰凝蛋白酶抑制剂CMTM6 Antibody2-溴-5-羟基甲

亮抑蛋白酶肽(进口)Phospho-DRP1 (Ser616) Antibody异烟酸甲酯

胃酶抑素A;抑肽素;胃蛋白酶抑制剂MeCP2 (D4F3) XP® Rabbit mAb二硫代酸二酯

岩藻糖；L-岩藻糖MeCP2 (D4F3) XP® Rabbit mAb1-氨基酮盐酸盐

果胶酶JMJD3 Antibody7-溴庚酸酯

β-淀粉酶(70万u/ml液体)HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb7-氨基庚酸酯盐酸盐

β-淀粉酶(酶活5万粉末)HDAC1 (D5C6U) XP® Rabbit mAb(1S,2S)-1,2-二基二

环加氧酶1(COX-1)ELISA试剂盒RNF126  环指蛋白126500 ul

花生四酸5脂氧合酶(Alox5)ELISA试剂盒RNF148  环指蛋白148100 ul

花生四酸12-脂氧合酶,白细胞型(Alox12l/Alox12/Alox15)ELISA试剂盒ROCK1  Rho相关蛋白激酶120 ul

花生四酸(AA)ELISA试剂盒ROCK2  Rho相关蛋白激酶2100 ul

红细胞生成素受体(EPOR)ELISA试剂盒RPLP0  酸性核糖体蛋白大亚基P0100 ul

红细胞生成素(EPO)ELISA试剂盒ROS/c ros  活性氧簇ROS100 ul

横纹肌辅肌动蛋白α (sm Actinin-α )ELISA试剂盒RPS6  S6核糖体蛋白100 ul

黑色素细胞(MC Ab)ELISA试剂盒Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser235/236)  酸化S6核糖体蛋白100 ul

核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)ELISA试剂盒Phospho-S6 Ribosomal Proin (Ser240/244)  酸化S6核糖体蛋白20 ul
猪链球菌基因分型PCR检测试剂盒价格F-box蛋白相关蛋白11抗体Sertaconazole中文名：舍他康唑别名：分子式：C20H15Cl3N2OS

FBXL5蛋白抗体Doxapram hydrochloride mohydrate中文名：盐酸多沙普仑别名：分子式：C24H33ClN2O3

FBXL12蛋白抗体Depofemin中文名：环戊丙酸雌二醇别名：分子式：C26H36O3

FBXL3蛋白抗体Quinestrol中文名：炔雌醇环戊醚别名：分子式：C25H32O2

F-box蛋白相关蛋白33抗体Tetracaine中文名：丁卡因别名：分子式：C15H24N2O2