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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
NAM [=N-(9-吖啶基)马来酰亚](>98.0%(HPLC))TCF8/ZEB1 (D80D3) Rabbit mAb十二烷基磺酸

2,萘二(>99.0%(GC))SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb硝酸异辛酯

DBD-F [=(N,N-二甲氨基磺酰)-7-氟-2,1,并恶二唑](>98.0%(HPLC))SHP-2 (D50F2) Rabbit mAb氮杂吲唑

N-(1-芘基)马来酰亚(>97.0%(HPLC))Phospho-eIF2α (Ser51) (D9G8) XP® Rabbit mAb2,1,并噻二唑

爱维莫潘Phospho-eIF2α (Ser51) (D9G8) XP® Rabbit mAb二基硫代酰盐酸盐

磺炳基十四烷基二甲甜菜Phospho-M-CSF Receptor (Tyr699) Antibody1-氧基-1-*硅氧基环烷

磺炳基十六烷基二甲甜菜GFAP (E6N9L) Mouse mAb2-吡-羧酸

聚氧月桂(Brij-35);Brij™ L23Myc-Tag (9B11) Mouse mAb (Sepharose® Bead Conjuga)(三氟甲基)

十二烷基硫酸锂Phospho-DARPP-32 (Ser97) (D11A5) Rabbit mAb3,5-二甲

诺纳德® P-40Myosin Va Antibody2-甲氧基-氨基甲酸甲酯

硫代甜菜 8Myosin IIa Antibody骈三氮唑 99.8%

硫代甜菜 10Myosin IIa Antibody1-氨基-1-环己酸

硫代甜菜 12Myosin IIb Antibody1-苄基哌

恩他卡朋;COMT抑制剂PI3 Kinase p110 δ (D1Q7R) Rabbit mAb基*氧基硅烷

曲拉通X-114Myosin IIc Antibody5-溴-2-酚

曲拉通X-405Myosin IIc Antibody野黄芩苷

异硫酸胍Phospho-M-CSF Receptor (Tyr923) Antibody硫酸氧钒

CHAPS;[(胆酰基)二甲氨基]-1-磺酸IRS-1 (D23G12) Rabbit mAb1,2,3,6-四氢邻二甲酰亚

基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA试剂盒Phospho-RasGRF1 (Ser916)  酸化Ras特异性鸟嘌呤核苷酸释放因子120 ul

基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)ELISA试剂盒RAR-Alpha   维甲酸受体-α 10 ug

基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)ELISA试剂盒RAR Beta  维甲酸受体β100 ul

基质金属蛋白酶9/明胶酶B(MMP-9/Gelatinase B) ELISA试剂盒RASSF1A  Ras相关区域家族1A20 ul

基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8/Collagenase II)ELISA试剂盒Pan-ras  Pan ras100 ul

基质金属蛋白酶7(MMP-7)ELISA试剂盒RCC1  染色体浓缩调控蛋白1100 ul

基质金属蛋白酶5(MMP-5)ELISA试剂盒Phospho-RCC1 (Ser11)  酸化染色体浓缩调控蛋白1100 ul

基质金属蛋白酶4(MMP-4)ELISA试剂盒Rb/RB1 proin  视网膜母细胞瘤相关蛋白1100 ul

基质金属蛋白酶3(MMP-3)ELISA试剂盒Phospho-Rb (Ser608)  酸化视网膜母细胞瘤相关蛋白1100 ul
猪蓝耳病病毒PCR检测试剂盒价格Hemk甲基转移酶家族1号蛋白抗体Pterokaurene L3中文名：别名：Pterokaurane L3分子式：C20H30O3

Hemk甲基转移酶家族2号蛋白抗体14-Deoxy-11,12-didehydroandrographiside中文名：别名：14-Deoxy-11,12-didehydroandrographoside分子式：C26H38O9

HEN1甲基转移酶同源蛋白1抗体8α-Hydroxylabda-13(16),14-dien-19-yl p-hydroxycinnamate中文名：别名：分子式：C29H40O4

乙肝病毒衣壳蛋白抗体Methyl dodonate A acetate中文名：别名：分子式：C23H30O5

丙型肝炎病毒1a基因型NS5蛋白抗体6α-Hydroxynidorellol中文名：别名：分子式：C20H34O3