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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基自由基(>95.0%(T))Caveolin-1 Antibody2,二甲基-吡咯羧酸酯

16-DOXYL-硬脂酸自由基(>95.0%(HPLC)(T))Gab2 (26B6) Rabbit mAb3,5-二甲基-2-吡咯甲

羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基自由基(>98.0%(GC))Gab2 (26B6) Rabbit mAb甲磺酸伊马替尼

羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基甲酸盐自由基(>97.0%(GC))α-E-Canin (23B2) Rabbit mAb3,4,5-三氟溴苄

异硫酰基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基自由基(>97.0%(GC)(T))α-E-Canin (23B2) Rabbit mAb羟基-三氟甲

(2-代酰氨基)-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基自由基(>98.0%(HPLC))Phospho-PAK4 (Ser474)/PAK5 (Ser602)/PAK6 (Ser560) Antibody肉桂酰

甲氧基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基自由基(>98.0%(GC)(T))PAK4 Antibody吲哚-酸

甲基酰氧-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧自由基(>98.0%(GC)(T))LAMP1 (C54H11) Rabbit mAb2-酰基吡

氧代-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基自由基(>95.0%(GC)(T))Flotillin-2 (L294) AntibodyFMOC-D-(噻吩基)-氨酸

2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基自由基(>98.0%(GC)(T))Profilin-1 (C56B8) Rabbit mAb5-氟-2-甲

氧代[5,10,15,20-四(吡啶基)卟吩]合钛(IV)(>90.0%(HPLC))Profilin-1 (C56B8) Rabbit mAb1-苄基-哌啶甲

CLA (>98.0%(HPLC))Pim-1 (C93F2) Rabbit mAbL-薄荷

MCLA (>98.0%(HPLC))Pim-1 (C93F2) Rabbit mAb1,2,3,四氢-1-萘

FCLA 自由酸[化学发光试剂]PKG-1 (C8A4) Rabbit mAb5-溴二氢吲哚

红-CLA(含氮量：9.00-10.30 %)Mic-1 (Y60) Antibody5-二并环庚酮

异鲁米诺(>98.0%(HPLC)(T))HER2/ErbB2 (M45) Antibody2-氨基-甲酸甲酯

双(N-甲基吖啶)硝酸盐(>97.0%(HPLC))TBR1 (D6C6X) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)1,3,5-*酰基-D-呋喃核糖

双(2,4,6-三)草酸酯(>98.0%(T))Phospho-Caveolin-1 (Tyr14) Antibody氧基酸

可溶性Toll样受体2(sTLR2)ELISA试剂盒PP2Ac  酸酯酶-2Ac100 ul

可溶性E选择素(sE-selectin)ELISA试剂盒PPAR-delta/beta   D型-过氧化酶活化增生受体100 ul

可溶性CD86(B7-2/sCD86)ELISA试剂盒PPAR alpha   α型-过氧化酶活化增生受体100 ul

可溶性CD80(sCD80)ELISA试剂盒PPAR Gamma  过氧化酶活化增生受体γ100 ul

可溶性CD40配体(sCD40L)ELISA试剂盒Phospho-PPAR Gamma (ser112)  酸化过氧化酶活化增生受体γ100 ul

可溶性CD30配体(sCD30L)ELISA试剂盒PPIG  亲环蛋白（亲环素）PPIG100 ul

可溶性CD23(sCD23)ELISA试剂盒Phospho-PPIG (Ser376)  酸化亲环蛋白（亲环素）PPIG100 ul

可溶性CD14(sCD14)ELISA试剂盒PKB/Akt1  蛋白激酶B100 ul

颗粒酶B(Gzms-B)ELISA试剂盒phospho-AKT/PKB (Ser473)  酸化蛋白激酶B1 Kit
植物源性成分PCR检测试剂盒价格磷酸化周期素依赖性激酶6抗体6,8-Di-O-methylcitreoisocoumarin中文名：别名：分子式：C16H18O6

磷酸化钙/钙调素依赖蛋白激酶2α抗体Aflavarin中文名：别名：分子式：C24H22O9

磷酸化周期素依赖性激酶2抗体Hydrangetin中文名：7-羟基-8-甲氧基别名：7-Hydroxy-8-methoxycoumarin分子式：C10H8O4

磷酸化α-连环蛋白抗体Dalbergin中文名：黄檀素别名：6-Hydroxy-7-methoxy-4-phenylcoumarin分子式：C16H12O4

周期素E2抗体5-Hydroxy-6,7,8-trimethoxycoumarin中文名：别名：分子式：C12H12O6