组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

​

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
吉拉德试剂 P(>95.0%(T))MCM4 Antibody2,2-二氟-2-溴酰

2-肼基吡啶(>98.0%(GC)(T))Jak2 (D2E12) XP® Rabbit mAb2-氨基-氟吡啶

2-肼盐酸盐(>98.0%(T))Jak2 (D2E12) XP® Rabbit mAb2-溴-5-甲酸

基-1,2,三唑啉-3,5-二酮(含氮量：23.50-24.30 %)Jak2 (D2E12) XP® Rabbit mAb1-甲基胍盐酸盐

[3,5-二甲基-(硝基苄氧基)基]-氧代丁酸琥珀酰亚酯(>96.0%(HPLC))Phospho-Gab1 (Tyr627) Antibody基-1,磺酸内酯

异酸对甲磺酰酯(>95.0%(T))Gab1 Antibody硝地平

N-叔丁基-α-基硝酮(>98.0%(HPLC)(T))Gab1 Antibody2-氟-5-甲酰基

N-叔丁基-α-(吡啶基-1-氧)硝酮(>98.0%(HPLC)(T))Phospho-Gab1 (Tyr627) (C32H2) Rabbit mAb氟-

5,5-二甲基-1-吡咯啉 N-氧化物(>97.0%(GC)(T))Phospho-Gab1 (Tyr627) (C32H2) Rabbit mAb5-苄硫基四氮唑

5-(二氧基酰)-5-甲基-1-吡咯啉 N-氧化物(>98.0%(N))Autophagy Vesicle Elongation (Atg12 Conjugation) Antibody Sampler Kit2-羟基-硝基-甲基吡啶

亚(>98.0%(GC))SPHK2 (D2V3G) Rabbit mAb2-氨基-甲基-5-硝基吡啶

2,4,6-三叔丁基亚(>98.0%(GC))Phospho-Gab1 (Tyr307) Antibody2-溴基酮

3,3,5,5-四甲基-1-吡咯啉 N-氧化物(>98.0%(GC))Phospho-Gab1 (Tyr307) Antibody盐酸羟

氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧自由基(>97.0%(GC))SKAR Antibody[-(三氟甲基)基]-哌啶

酰氨基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基自由基(>98.0%(GC))TFEB (D4L2P) Rabbit mAb3,4,5-三溴

羧基-2,2,5,5-四甲基吡咯烷-1-氧基自由基(>98.0%(HPLC)(T))α-E-Canin Antibody3,5-二溴-2-羟基吡

羧基-2,2,6,6-四甲基哌啶1-氧基自由基(>97.0%(GC)(T))α-E-Canin AntibodyBOC-胍

(2-酰氨基)-2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基自由基(>96.0%(HPLC))Profilin-1 Antibody3,5-二甲基-1H-吡咯-2-甲酸酯

鸡5核苷酸酶(5-NT)ELISA试剂盒PNK1/PNKP  多聚合苷酸激酶3酸化酶100 ul

鸡Ⅱ型胶原(Col Ⅱ)ELISA试剂盒Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118)  酸化多聚合苷酸激酶3酸化酶20 ul

鸡Ⅰ型胶原N末端肽(NTX)ELISA试剂盒Podoplanin/gp36  平足蛋白100 ul

鸡17-酮类固(17-KS)ELISA试剂盒Pokemon  蒙蛋白100 ul

鸡17羟皮质类固(17-OHCS)ELISA试剂盒Polycystin 1  多囊肾蛋白1100 ul

鸡13,14二氢15-酮F2α(PGFM)ELISA试剂盒Polycystin 2  多囊肾蛋白2100 ul

ELISA试剂盒PP-1B  蛋白酸酯酶-1B100 ul

可溶性白介素-2 受体(sIL-2R)ELISA试剂盒PP2A alpha  蛋白质酸酶-2A100 ul

可溶性Toll样受体6(sTLR6)ELISA试剂盒PP2A alpha  蛋白质酸酶-2A20 ul
一步法RT-PCR试剂盒人白三烯C4(LTC4)ELISA试剂盒英文名称：Human Leukotriene C4，LT-C4 ELISA Kit进口/原装

人白三烯D4(LTD4)ELISA试剂盒英文名称：Human leukotriene D4，LT-D4 ELISA Kit*

人白三烯E4(LTE4)ELISA试剂盒 英文名称：Human leukotriene E4，LT-E4 ELISA Kit *

人白色念珠菌(C.albicans)ELISA试剂盒英文名称：Human Candida Albicans，C.albicans ELISA Kit*

人白细胞弹性蛋白酶(HLE)ELISA试剂盒 英文名称：Human leukocyte exastase，HLE ELISA Kit*

人白细胞共同抗原(LCA/CD45)ELISA试剂盒英文名称：Human leukocyte common antigen,LCA/CD45 ELISA Kit*小鼠中性粒细胞趋化蛋白2(NAP-2/CXCL7)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠脂联素(ADP)ELISA试剂盒      组装/原装