注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
四甲基硅烷[>99.0%(GC),用于核磁共振]Phospho-M-CSF Receptor (Tyr809) Antibody氨基-2-甲氧基吡啶

(*基硅基)-1-磺酸钠(>98.0%(T))Phospho-M-CSF Receptor (Tyr723) (49C10) Rabbit mAb2-溴-5-代

三氟化-络合物(>98.0%(W))Progesrone Receptor B (C1A2) Rabbit mAb苄氧基吲哚

二甲基硒(>98.0%(GC))IFN-γ (3F1E3) Mouse mAb甲基三氧基硅烷

六氟(>99.0%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr751) Antibody溴-3,5-二氟

四甲基锡(>96.0%(GC))PDGF Receptor β Antibody3,二甲氧基酚

二二茂锆(>97.0%(T))PDGF Receptor α Antibody1,2,三-5-

Chirabi-AR[用于核磁共振]cGAS (D3O8O) Rabbit mAb (Mouse Specific)2-氨基-5-硝基-2'-二甲酮

三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)镨(III)(＞98%(T))Zap-70 (D1C10E) XP® Rabbit mAb2,6-二苄

三(2,2,6,6-四甲基-3,5-庚二酮酸)铕(III)(＞95%(T))Zap-70 (D1C10E) XP® Rabbit mAb(三氟甲基)吡唑

三(6,6,7,7,8,8,8-七氟-2,2-二甲基-3,5-辛二酮基)镨(Ⅲ)(>97.0%(T))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr751) (88H8) Mouse mAb2-溴-1--氟

(S)-(+)-1,1'-联萘基-2,2'-双酸氢酯(>97.0%(T))FTO (D6Z8W) Rabbit mAbN-酰-L-氨酸

(R,R)-(-)-2,丁二(>96.0%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr740) (32A9) Rabbit mAbN-苄氧羰基-L-亮氨酸

(S,S)-(+)-2,丁二(>97.0%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr740) (32A9) Rabbit mAb()酸

(+)-苄甲基硅基酸(>98.0%(T))PDGF Receptor β (28E1) Rabbit mAb2-甲氧基-氨基吡啶

(-)-苄甲基硅基酸(>98.0%(T))PDGF Receptor β (28E1) Rabbit mAb氨基-2-甲氧基吡啶

(-)-樟脑烷酸(>98.0%(T))Phospho-PDGF Receptor α (Tyr849)/PDGF Receptor β (Tyr857) (C43E9) Rabbit mAb2-溴-5-代

(R)-(-)-N-(3,5-二甲酰)-α-Phospho-PDGF Receptor α (Tyr849)/PDGF Receptor β (Tyr857) (C43E9) Rabbit mAb苄氧基吲哚

鸡表皮生长因子(EGF)ELISA试剂盒Pin1  肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl100 ul

鸡半糖凝集素-3(Gal-3)ELISA试剂盒Phospho-Pin1 (Ser16)  酸化肽基脯氨酞顺反异构酶Pinl20 ul

鸡白血病抑制因子(LIF)ELISA试剂盒PIWIL1  piwi样1蛋白100 ul

鸡白介素9(IL-9)ELISA试剂盒PKA  蛋白激酶A20 ul

鸡白介素8(IL-8)ELISA试剂盒Phospho-PKA C (Thr197)  酸化蛋白激酶C亚性100 ul

鸡白介素6受体(IL-6R)ELISA试剂盒PKB/AKT-1  蛋白激酶B（来源）20 ul

鸡白介素6(IL-6)ELISA试剂盒PLASTIN3/T Plastin  丝束蛋白T Plastin100 ul

鸡白介素4(IL-4)ELISA试剂盒PLC beta 3/Phospholipase C beta 3  酯酶Cβ320 ul

鸡白介素3(IL-3)ELISA试剂盒Phospho-PLC beta3 (Ser537)  酸化酯酶Cβ3500µl
玉米TPCR检测试剂盒规格9号染色体开放阅读框57抗体3,4'-Dihydroxy-3',5,7-trimethoxyflavan中文名：别名：分子式：C18H20O6

9号染色体开放阅读框6抗体5,7-Diacetoxyflavone中文名：别名：分子式：C19H14O6

9号染色体开放阅读框62抗体Wogonin中文名：汉黄芩素别名：5,7-Dihydroxy-8-methoxyflavone分子式：C16H12O5

9号染色体开放阅读框64抗体Amarol A中文名：别名：分子式：C15H12O8

9号染色体开放阅读框66抗体5-Acetoxy-7-hydroxyflavone中文名：别名：分子式：C17H12O5
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。