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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
甲(>99.8%(GC))Met (25H2) Mouse mAb3,3'-二吲哚

正辛烷(>98.5%(GC))ARP2 Antibody10-羟基喜树

(>99.5%(GC))ARP2 Antibody-邻甲肼盐酸盐

庚烷(>99.0%(GC))Phospho-Met (Tyr1234/1235) (3D7) Rabbit mAb对叔丁基苄

酸酯(>99.5%(GC))Phospho-Met (Tyr1234/1235) (3D7) Rabbit mAb2,二

酸丁酯(>99.0%(GC))c-IAP2 (58C7) Rabbit mAb2-溴

酸异戊酯(>98.0%(GC))c-IAP2 (58C7) Rabbit mAb3,5-二-1-溴

(>99.5%(GC))VASP (9A2) Rabbit mAb2-甲基-甲酸

(>99.5%(GC))VASP (9A2) Rabbit mAb2-甲基-甲酸

1-丁(>99.0%(GC))Phospho-Met (Tyr1349) (130H2) Rabbit mAbN-酰基-D-亮氨酸

溴(含稳定剂二)(>99.0%(GC))Phospho-Met (Tyr1349) (130H2) Rabbit mAb2,5-二氟酮

环己烷(>99.5%(GC))Phospho-Met (Tyr1349) (130H2) Rabbit mAb2-吡啶酸

二甲亚砜(>99.0%(GC))α-Actinin Antibody2-基吡

N,N-二甲酰(>99.5%(GC))Phospho-Met (Tyr1003) (13D11) Rabbit mAb2-氟-6-

甲酸酯(>98.0%(GC))Phospho-Met (Tyr1003) (13D11) Rabbit mAb甲基 吡咯烷-甲酸甲酯 盐酸盐

甲酸甲酯(>98.0%(GC))CDK6 (DCS83) Mouse mAbO-6-苄基鸟嘌呤

庚烷(>99.0%(GC)]CDK6 (DCS83) Mouse mAb2-氟酸

己烷(>96.0%(GC)]Phospho-Ack1 (Tyr284) AntibodyN-2-酰鸟嘌呤

鸡胆囊收缩素A受体(CCKAR)ELISA试剂盒Phospho-PERK (Thr980)  酸化蛋白激酶样内质网激酶100 ul

鸡单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSVⅡ-Ab)ELISA试剂盒PFK2/PFKFB3  6酸果糖激酶2100 ul

鸡催素(PRL/LTH)ELISA试剂盒Phospho-PFK2 (Ser466)  酸化6酸果糖激酶2100 ul

鸡促肾上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒Fascin1  纤维束1100 ul

鸡促卵泡素(FSH)ELISA试剂盒phospho-FSCN1(Ser39)  酸化纤维束蛋白同源物1100 ul

鸡促甲状腺素(TSH)ELISA试剂盒PG-C  胃蛋白酶原C500 ul

鸡雌二(E2)ELISA试剂盒PPARGC1A/PGC-1 Alpha  过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活子1α100 ul

鸡传染性支气管炎(IB)ELISA试剂盒PGRN  颗粒蛋白前体1 Kit

鸡传染性法氏囊病(IBD)ELISA试剂盒Prohibitin  抑制素/肿瘤抑制因子100 ul
玉米MSPCR检测试剂盒厂家真核启动因子2α抗体(eIFα2)2-Ami-3-benzyloxypyridine中文名：2-氨基-3-苄氧基吡啶别名：分子式：C12H12N2O

磷酸化一氧化氮合成酶3（内皮型）抗体N-(4-Amibenzoyl)-β-alanine中文名：对氨基苯甲酰-β-丙氨酸别名：分子式：C10H12N2O3

抗志贺毒素大肠杆菌O139抗体（仔猪肿病志贺毒素大肠杆菌O139）2-(2-Amiethyl)-1-methylpyrrolidine中文名：2-(2-氨乙基)-N-甲基吡咯烷别名：分子式：C7H16N2

肠出血性大肠杆菌埃希氏菌O157:H7抗体5-Amifluorescein中文名：5-氨基荧光素别名：分子式：C20H135

磷酸化丝裂原活化蛋白激酶ERK抗体4-Ami-2,5-dimethoxy-N-phenylbenzenesulphonamide中文名：4-氨基-2,5-二甲氧基-N-苯基苯磺酰胺别名：分子式：C14H16N2O4S