注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
溴菊酯标准溶液(100μg/ml,基体：石油)F4/80 (BM8.1) Rat mAb (APC-Cy7® Conjuga)2--5-基酸

草萘(标准品)α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAbCHLORO-5-BUTOXYPHENYLBORONIC ACID, PINACOL ESR

除虫脲标准溶液(100μg/ml,u=2%，基体：酮)α-Smooth Muscle Actin (D4K9N) XP® Rabbit mAb2,二-1-

除虫脲标准溶液(10μg/ml,u=3%)ST14/Matriptase Antibody环己基-D-氨酸水合物

2，滴酸(标准品)BST2 (D5V5Z) Rabbit mAb基二硫

2，滴酸(98%)Arginase-2 Antibody甲基吲哚-2-甲

二噻农(标准品)PCSK7 (D4I5G) Rabbit mAb2,5-二(基)-1,3,恶二唑

棉隆(标准品)HELQ (D4K2O) Rabbit mAb2-氟-6-(三氟甲基)

双酚(标准品)Di-Methyl-RPL29 (Lys5) (D8T9P) Rabbit mAb甲基酰氧基基三氧基硅烷

异净(标准品)Cas9 (<i>S. pyogenes</i>) (E7M1H) XP® Rabbit mAbNα-(叔丁氧羰基)-L-色氨酸 N-琥珀酰亚酯

异菌脲标准溶液(100μg/ml,u=4%)Cas9 (<i>S. pyogenes</i>) (E7M1H) XP® Rabbit mAb-2,6-二氟酸

异(标准品)Glucocorticoid Receptor (D8H2) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)5-RT-BUTYL-(NITROPHENYL)-1,2,OXADIAZOLE

1,二-d4(标准品)MEKK2 Antibody(CHLORO-METHYLPHENYL)-1H-1,2,TRIAZOL-5(4H)-ONE

2,2,3,3,4,4,5,56,6-十溴代-1,1-联(标准品)Androgen Receptor (AR-V7 Specific) (E3O8L) Rabbit mAb4,4'-亚甲基双(2,6-二甲基)酚

二环戊二环氧化物(97%)Cystathionine γ-Lyase (D1N1D) Rabbit mAb邻苄基

1,2-二烷(standard for GC,>99.9%(GC))CD16A (D8W2O) Rabbit mAb吡啶

1,2-二烷(for HPLC,≥99.9%)Calreticulin (D3E6) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)2,二氟-6-酚

1,2-二烷标准熔液(1.00mg/ml,基体：甲)Phospho-STING (Ser366) (D7C3S) Rabbit mAb双(2,4,6-三)草酸酯

白介素3(IL-3)ELISA试剂盒IRF7  干扰素调节因子7100 ul

白介素2诱导的T细胞激酶(ITK)ELISA试剂盒Phospho-IRF7 (Ser471/472)  酸化干扰素调节因子7100 ul

白介素2受体(IL2R)ELISA试剂盒IRS P53  胰岛素受体底物p53蛋白100 ul

白介素2可溶性受体β链(IL-2sRβ)ELISA试剂盒IRS1  胰岛素受体底物-120 ul

白介素2可溶性受体α链(IL-2sRα/CD25)ELISA试剂盒phospho-IRS1(Ser307)  酸化胰岛素受体底物-1100 ul

白介素29(IL-29)ELISA试剂盒phospho-IRS1(Ser1101)  酸化胰岛素受体底物-1250 ml

白介素28B(IL-28B)ELISA试剂盒phospho-IRS1(Ser302)  酸化胰岛素受体底物-125 ml

白介素28A(IL-28A/IFN-λ2)ELISA试剂盒phospho-IRS1(Ser332/336)  酸化胰岛素受体底物-15 mg

白介素26(IL-26)ELISA试剂盒phospho-IRS1(Ser612)  酸化胰岛素受体底物-15 mg
日本血吸虫PCR检测试剂盒厂家纤维蛋白原β链抗体Cefotaxime sodium中文名：头孢噻肟钠别名：分子式：C16H17N5NaO7S2

叉头蛋白B1抗体Triamcilone acetonide中文名：曲安奈德别名：分子式：C24H31FO6

髓鞘缺陷相关蛋白抗体Tryptophan中文名：别名：(+)-Tryptophan分子式：C11H12N2O2

叉头蛋白B1+B2抗体4,6-Dichloro-2-(propylthio)pyrimidin-5-amine中文名：别名：分子式：C7H9Cl2N3S

叉头蛋白G1抗体4,6-Dichloro-5-nitro-2-propylthiopyrimidine中文名：别名：分子式：C7H7Cl2N3O2S
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。