注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
中粘度羟基纤维素Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (Sepharose® Bead Conjuga)三氟代甲磺酸钙盐

吲哚基-beta-D-吡喃半糖苷(>98%(TLC),BR)Phospho-PLCγ1 (Tyr783) (D6M9S) Rabbit mAb2-溴-5-甲氧基

吲哚基-beta-D-葡糖苷酸环已盐(>98%(HPLC),BR)SignalSilence® VPRBP siRNA I环十五内酯

酸(>99%,BC)Lipopolysaccharides (LPS)2,5-二

一化(>98%,BC)PC2 (D1E1S) XP® Rabbit mAb1-二甲基-羟基氮杂环丁烷盐酸盐

酸(>98.5%,BR)PC2 (D1E1S) XP® Rabbit mAb氨基甲酸丁酯

代(>98%,医药级)Miro2 Antibody2,2-二甲基环

硫化铁 (II)(>70%,BR)Phospho-Tyrosine (P-Tyr-1000) MultiMab™ Rabbit mAb mix (Magnetic Bead Conjuga)双(酰基酮酸基)钛氧化物

四氧化三铁(>98%,BR)BMAL1 (D2L7G) Rabbit mAb替洛隆盐酸盐

氧化铁(III)(>98%,BC)LEF1 (C12A5) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-甲氧基-(三氟甲基)基酸

正酸铁(>98%,BR)SimpleChIP® Human HSP70 Intron 1 Primers三氟甲磺酸铁(III)

还原铁粉(>98%,BC)PRNP (D3Q5C) Rabbit mAb甲硫基酯

1-溴代异戊烷(>98%,BR)Phospho-GSK-3β (Ser9) (D85E12) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)2,二氟-氧基酸

异佛尔酮(>98%,BR)IRF-1 (D5E4) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)1,2-二(2-氨基氧基)烷

异(>98%,BR)P-Cadherin (12H6) Mouse mAb丁基吗啉

异香草(>98%,BR)HA-Tag (C29F4) Rabbit mAb (HRP Conjuga)L-核糖

异香草(标准品)GPR50 (D1D6I) Rabbit mAb氧基-(甲氧基氧基)甲

衣康酸(>98%,BR)Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb (HRP Conjuga)2,5-二氟

脯氨酸/谷氨酰富含性剪接因子(SFPQ)ELISA试剂盒HB-EGF/DTSF  肝素结合性表皮生长因子100 ug

封闭蛋白4(CLDN4)ELISA试剂盒URG4  上调基因4(N端)100 ul

分泌性白细胞蛋白酶抑制因子(SLPI)ELISA试剂盒URG4 (C rminal)  上调基因4（C端）100 ul

分泌型免疫球蛋白A(SIgA)ELISA试剂盒HBV pre S1/S2 proin  肝病毒pre S1/S2100 ug

分泌型脂酶A2(sPLA2)ELISA试剂盒HCG Beta  绒毛膜促性腺激素β亚基单抗100 ul

分泌型卷曲相关蛋白5(SFRP5)ELISA试剂盒BRI3BP/HCCR-1  基因/bri3结合蛋白100 ul

分泌型卷曲相关蛋白4(SFRP4)ELISA试剂盒HCG alpha   绒毛膜促性腺激素α 亚基单抗100 ul

分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)ELISA试剂盒Beta-HCG   β亚基绒毛膜促性腺激素100 ul

分泌型卷曲相关蛋白1(SFRP1)ELISA试剂盒HCG Alpha   绒毛膜促性腺激素α亚基100 ul
禽流感病毒HN亚型PCR检测试剂盒价格2号染色体开放阅读框88抗体Taspine中文名：塔斯品碱别名：分子式：C20H196

载脂蛋白D抗体Echitoveniline中文名：别名：分子式：C31H36N2O7

粘附调节分子1抗体Caulophylline B中文名：别名：分子式：C19H215

G蛋白偶联受体ARHGEF18抗体Scandine Nb-oxide中文名：别名：分子式：C21H22N2O4

酸敏感离子通道1抗体1-Hydroxyacridone中文名：1-羟基吖啶酮别名：分子式：C13H92
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。