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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
盐酸法舒地尔(标准品)HES1 (D6P2U) Rabbit mAb5-氨基嘧啶

酚-O-β-D-槐糖苷；酚-O-槐糖苷Phospho-p90RSK (Ser380) (D3H11) Rabbit mAb氨基-2-羟基吡啶

草质素苷(标准品)nsin 2 Antibody噻吩-2-羧酸

红景天素；草质素甙；Calumenin (4C6) Mouse mAb1-BOC-吡咯烷-甲酸

地达诺辛；去羟肌苷Phospho-MARCKS (Ser159/163) (D13D2) Rabbit mAb吡咯烷-甲酸

羊藿次苷IPhospho-KIF1B (Ser1487) Antibody2-甲基-甲酸甲酯

宝藿苷II；大花羊藿苷A；意卡瑞苷A(标准品)Phospho-DDR1 (Tyr792) AntibodyBOC-DL-脯氨酸

槐属苷(标准品)SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb基磺酰

槐属苷SDHA (D6J9M) XP® Rabbit mAb2-氨基-3,5-二溴-6-甲基吡啶

甲基麦冬二氢高异黄酮A,甲基麦冬黄烷酮APathScan® Total Smad2/3 Sandwich ELISA KitN-基-N-羟基间甲

甲基麦冬黄烷酮BPathScan® Phospho-Smad2 (Ser465/467)/Smad3 (Ser423/425) Sandwich ELISA Kit6-甲基

7,2'-二羟基-3′,4′-二甲氧基异黄烷PathScan® Total Smad3 Sandwich ELISA Kit丁二酸二异酯

6aR,11aR）羟基-9，10-二甲氧基紫檀烷PathScan® Phospho-Smad3 (Ser423/425) Sandwich ELISA KitN-基吗啉

千层纸素A-7-0-β-D-葡萄糖酸苷PhosphoPlus® IGF-I Receptor β Antibody DuetN-基哌

泮托拉唑钠1.5水合物Phospho-REPS1 (Ser709) (D8C1) Rabbit mAb7-氨基庚酸

泮托拉唑钠1.5水合物(标准品)Glucocorticoid Receptor (D8H2) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)基甲酸

(S)-10-羟基喜树;10-羟基喜树FoxK2 Antibody硝基-羟氨基酚

10-羟基喜树(标准品)SSRP1 Antibody一环戊烷

Ⅲ型前胶原肽(PⅢP)ELISA试剂盒phospho-CYLD(Ser418)  酸化微管结合蛋白CYLD100 ul

Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNT)ELISA试剂盒CYP1A1  细胞色素P450 1A1100 ul

Ⅲ型前胶原(HPCⅢ)ELISA试剂盒P450 1A2/CYP1A2  细胞色素P450 1A220 ul

Ⅲ型胶原(Col Ⅲ)ELISA试剂盒CYP11A1/P450SCC  细胞色素P450 11A1100 ul

3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA试剂盒CYP2C9   细胞色素P450 2C9100 ul

3-α羟基类固脱氢酶(Akr1c9)ELISA试剂盒CYP3A4  细胞色素P450 3A4100 ul

3-O-甲基多巴(3-OMD)ELISA试剂盒CYP2D6  细胞色素P450 2D61 Kit

Ⅱ型胶原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)ELISA试剂盒CYP19  细胞色素P450 19100 ul

Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)ELISA试剂盒CYP8A1/PTGIS  前列环素合成酶100 ul
轮状病毒PCR检测试剂盒规格EB病毒核抗原-3B抗体(R)-4-Benzyl-2-oxazolidine中文名：(R)-4-苄基-2-恶唑烷酮别名：分子式：C10H112

内皮素B受体抗体Benzyl cinnamate中文名：肉桂酸苯甲酯别名：分子式：C16H14O2

附睾蛋白酶抑制蛋白N-Benzylphthalimide中文名：N-苯甲基邻苯二甲酰亚胺别名：分子式：C15H112

外生性骨疣样蛋白2抗体2-Benzoylbenzoic acid中文名：2-苯甲酰苯甲酸别名：BB 酸分子式：C14H10O3

烯脂酰辅酶A解酶抗体2-Benzyl-2-(dimethylami)-4'-morpholibutyrophene中文名：2-苄基-2-(二甲基氨基)-4'-吗啉基苯基丁酮别名：分子式：C23H30N2O2