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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
L-Homoserine3-(环已胺)-1-磺酸 ≥98.0%0.95

D-allo-Isoleucine3-(环己胺)-1-磺酸 超纯级 分析标准品，95%

Aspartame3-(环已胺)-2-羟基-1- 99%黄豆苷原 分析标准品，≥98%

FMOC-C13-(环已胺)-2-羟基-1- 99.5%黄豆苷原 98%

TBTU3-氯-2-羟基磺酸钠  95%靛玉红 分析标准品，≥95%

Amimethyl resin3-[(3-胆固氨基)二甲基氨基]-1-磺酸 98%靛玉红 95%

2-Chlorotrityl chloride resin2-环己胺基乙磺酸 ≥99.5% (T)鬼臼毒素 98%

Hydroxymethyl resin2-环己胺基乙磺酸 ≥99.0% (T)鬼臼毒素 分析标准品，>98%

MBHA resin分子生物学级利血平 ≥99.0% (HPLC)

Merrifield resin3-[(3-胆固氨基)二甲基氨基]-2-羟基-1-磺酸 99%东莨菪碱酸盐 98%

Polystyrene resin3-(二丁氨基)胺 97%粉防己碱 分析标准品，≥98%

Rink-Amide resin十二烷基*基氯化铵 99%维生素D3 98%

Rink Amide AM resin十二烷基*基氯化铵 99%，离子对色谱级维生素D3 分析标准品

Trityl chloride resin十二烷基*基溴化铵 99%二茂铁 99%

Wang resin十二烷基*基溴化铵 for ion pair chromatography, ≥99.0%草酸二甲酯 CP，98%

Dopamine hydrochloride3-磺基十六烷基二甲甜菜碱 98%草酸二甲酯 GR，99%

磷酸二氢铵（分析标准品,用于凯氏定氮法氮测定,≥99.5%）5-Methylcytosine (5-mC) (D3S2Z) Rabbit mAbORP150  氧气调节蛋白150抗体

磷酸二氢铵(for HPLC,≥99.0%(T))Syntaxin 6 (C34B2) Rabbit mAbOrosomucoid 2  类粘蛋白2抗体

Amberlite XAD7HP 离子交换树脂(Mesh 20-60)Syntaxin 6 (C34B2) Rabbit mAbOrexin-A  增食欲素A/欲激素A

Amberlite XAD-4 非离子型大孔树脂(粒径0.49 - 0.69 mm)MEK1/2 (D1A5) Rabbit mAb (PE Conjugate)ORAV1  口腔癌高表达的蛋白1抗体

乙(梯度色谱级, ≥99.9%)Bcl-2 Antibody (Human Specific)Orai2  跨膜蛋白Orai2抗体

无乙(无级, 99.9%,H2O≤10ppm)Bcl-2 Antibody (Human Specific)OPN/BSP  骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1)人

无乙(H2O:20-30ppm)ATM (D2E2) Rabbit mAbOPN/BSP  骨桥蛋白抗体(分泌型磷蛋白1)

无乙(无级, 99.8%,H2O：30-50ppm)ATM (D2E2) Rabbit mAbOPGL/RANKL/ODF  骨保护蛋白配体抗体(破骨细胞分化因子)

茴香烯(分析标准品，用于萜烯分析，≥99.5% (GC))Phospho-Bcl-2 (Thr56) Antibody (Human Specific)OPG  骨保护蛋白/护骨素抗体

4-氨基-3-(三氟甲基)苯甲(98%)Phospho-Bcl-2 (Thr56) Antibody (Human Specific)OPCML  阿片样物质结合蛋白/细胞粘附分子样蛋白抗体
文氏密螺旋体PCR检测试剂盒厂家4-Bromobenzenesulfonyl chloride, ≥98.0%通用试剂　25G

α-Bromoisobutyryl bromide ,≥98.0%通用试剂　25G

Isophthaloyl chloride ,≥99.0%通用试剂　100G

2-Bromopropionyl bromide ,≥97.0%通用试剂　25G

Bromoacetyl bromide ,≥97.0%通用试剂　25G

Trimethylacetyl chloride,≥98.0%通用试剂　100ML

Cinnamoyl chloride通用试剂　25G

Tetrahydrofurfuryl chloride通用试剂　25G

Methyl chlorooxoacetate通用试剂　5G

Methacryloyl chloride ,≥95.0%通用试剂　25G

Trifluoromethanesulfonyl chloride,≥99...通用试剂　5G

3-(Trifluoromethyl)benzoyl chloride ,...通用试剂　5G

2-(Trimethylsilyl)ethoxymethyl chlorid...通用试剂　1ML

3-Nitrobenzenesulfonyl chloride通用试剂　5G

2-Nitrobenzoyl chloride ,≥96.0%通用试剂　5G