​
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
Potassium clavulanate间二溴苯 97%D-葡萄糖-6-磷酸 ~1 M in H2O ( 260 mg/ml)

Rapamycin溴代异戊烷 96%β-D-葡萄糖-6-磷酸钠盐 97%

(+)-Usniacin溴乙酸甲酯 97%甘脲 98%

VCR溴烷 >99.0%(GC)D-半乳糖胺盐酸盐 99%

Azlocillin sodium三溴 AR,98%D-半乳糖胺盐酸盐 for cell culture,99%

Gatifloxacin香柏油 FMP(显微镜用）D-氨基葡萄糖硫酸盐 98%

Furaltadone氯代十六烷 97%3-正十六烷基噻吩 97%

Cloxacillin sodium salt hydrate烯酰氯, 96%,含~0.05% 噻吩稳定剂异基-β-D-硫代半乳糖苷 98%

Anisomycin2-氨基-6-甲基吡啶 98%2,3:4,5-二-O-异亚基-β-D-吡喃果糖 99%

Bafilomycin A1 from Streptomyces griseus乙酸烯酯 99%乳果糖 99%

Bestatin2-氨基-5-甲基吡啶 99%溶菌酶，鸡蛋白 40000U/mg

Sodium cromoglycate溴烯, 包含≤1000 ppm 氧化烯稳定剂, 98%D(-)-来苏糖 99.0%

Destomycin庚酸烯酯 98%L-来苏糖 99%

Dihydrostreptomycin sesquisulfate庚酸烯酯 ≥97%, FCC, Kosher, FGL-(-)-半乳糖 99%

Geldanamycin己酸烯酯 ≥98%, FCC，FGL-(-)-葡萄糖 98%

Hypericin己酸烯酯 98%D-甘露糖 99%

1,2,4-三氯苯(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Phospho-ROS1 (Tyr2274) AntibodyNeurturin  神经生长因子抗体

四氯乙烯(Standard for GC,≥99.9%(GC))FastScan™ Phospho-SLP-76 (Ser376) ELISA KitNeurotrimin/HNT  神经营养因子HNT抗体

磷酸三乙酯(TEP)(Standard for GC,>99.7%(GC))Phospho-Aurora A (Thr288) (C39D8) Rabbit mAbNeurotensin/NTS  神经紧张素抗体

三乙烯四胺（TETA）(Standard for GC)Phospho-Aurora A (Thr288) (C39D8) Rabbit mAbNeuropilin-2  神经纤毛蛋白-2抗体

1,3,5-*苯(Standard for GC, ≥99.0% (GC))Phospho-M-CSF Receptor (Tyr708) AntibodyNeuroligin 3  突触细胞粘附分子3抗体

Standard for GC,≥99.5%(GC))C/EBPbeta AntibodyNeuroligin 1  突触细胞粘附分子1抗体

1,2,3,4-四氯苯(Standard for GC)Stat3 (D1B2J) Rabbit mAbNeurogenin 2/NGN2  神经元素2抗体

三乙胺(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Phospho-M-CSF Receptor (Tyr546) AntibodyNeurofascin/Nfasc155  神经束蛋白155抗体

十三烷(Standard for GC,>99%(GC))Phospho-C/EBPβ (Thr235) AntibodyNeuroD1/NEUROD  神经细胞分化因子1抗体

1,1,1-三氯乙烷(包含0.05% C4H8O2 稳定剂,standard for GC,≥99.5%(GC))Phospho-C/EBPβ (Thr235) AntibodyNeurocan  神经粘蛋白抗体
鞭虫通用PCR检测试剂盒说明书Ephrin A2抗体(1R,2R)-1-Ami-2-indal中文名：(1R,2R)-1-氨基-2-茚醇别名：分子式：C9H11

内皮抑素/内皮他丁抗体Amorolfine hydrochloride中文名：盐酸阿莫洛芬别名：分子式：C21H36Cl

雌激素受体β抗体2-Ami-4-phenylphel中文名：2-氨基-4-苯基苯酚别名：分子式：C12H11

内质网Aβ相关结合蛋白抗体5-Ami-1-naphthol中文名：5-氨基-1-萘酚别名：别嘌呤E分子式：C10H9

丝裂原活化蛋白激酶1抗体(1S,2S)-1-Ami-2-Indal中文名：(1S,2S)-1-氨基-2-茚醇别名：分子式：C9H11