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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
2-Ami-1-phenylethalN-乙基-N-(2-羟基-3-磺基)-3-甲氧基苯胺钠盐 99%2,3-二甲氧基苯甲酸 99%

cis-4-Hydroxy-D-prolineN-乙基-N-（3-磺基）苯胺钠盐 99%对羟基苯甲酸酯钠 USP,Ph Eur

DON2-乙基己氧基胺 99%3,4,5-*氧苯 98%

L-(+)-Selemethionine固蓝B 90%1,2,4-苯三酸酐 97%

AdoMet固黑K盐 80%3-氯-2-甲基-1-烯 97%

L-Homocystine固深红 GBC 90%1,4-二乙基苯( PDEB ) GCS, ≥99.5% (GC)

L-Cystathionine固红 KL盐 Biological stain,含量90%1,4-二乙基苯 99%

Cys-Gly固红RC 生化试剂级甲基烯磺酸钠 99%

ε-PL固红 RL Biological stain1,4-二羟基蒽醌 96%

 α-Chymotrypsin(bovine)固红B 90%顺式-乌头酸 90%

糊精化酶固红TR半氯化锌盐 90%顺式-乌头酸 分析标准品，98%

α-Amylase from Aspergillus oryzae固红-萘磺酸 TR 95% ≥97% (HPLC)

β-Amylase固红紫LB盐 95% 分析标准品，≥97%

Pectinase固紫B盐 80%次  分析标准品

Pectolyase Y-23N-2-羟乙基哌-N'-2-乙磺酸钠盐 99%中 分析标准品，≥98%

BromelaineN-2-羟乙基哌-N'-2-乙磺酸钠盐  99.5%硬脂酸钙 Ca 6.6-7.4%

溴代异烷(标准品)ERC1 (P85) AntibodyO-GlcNAc transferase  O位N-乙酰葡萄糖胺OGT抗体

乙酸苄酯(标准品)ERC1α (D1055) AntibodyOGG1/8 hydroxyguanine DNA glycosylase  8-羟基鸟嘌呤DNA糖基化酶

2-溴苯酚(标准品)ERp44 AntibodyOGFOD2  末端多聚腺苷酸2蛋白抗体

邻苯二甲酸丁苄酯(标准品)ERp57 (A484) AntibodyOGFOD1  末端多聚腺苷酸1蛋白抗体

邻苯二甲酸丁苄酯标准溶液(1000μg/ml,溶剂：甲)Phospho-IGF-I Receptor β (Tyr1316) AntibodyODZ3/Teneurin 3  固生蛋白3抗体

联苯菊酯(标准品)tch3 AntibodyODF3B  外致密纤维蛋白3B抗体

联苯菊酯标准溶液(100μg/ml,u=3%,基体：石油)Oct-4A (C52G3) Rabbit mAbODF3/CT135  肿瘤/抗原135抗体

苄嘧磺隆(标准品)M-CSF Receptor (E4T8Z) Rabbit mAbODF2/Cenexin1  尾部结构蛋白抗体

草除灵(标准品)Calreticulin AntibodyODC  鸟氨酸脱羧酶抗体

仲丁(标准品)VEGF Receptor 1 AntibodyOCT6  八聚体结合转录因子6抗体
米氏旋毛虫PCR检测试剂盒规格(R)-(+)-BINAP,98%表面活性剂　1G

HCTU,≥98.0%通用试剂　5G

mo-Methyl terephthalate,97%通用试剂　5G

TBTU,≥97.0%通用试剂　5G

Methyl cinnamate,≥99.0%通用试剂　100G

2-Naphthyl acetate,98%通用试剂　5G

2-Butoxyethyl acetate,99%通用试剂　100ML

Ethylene glycol dimethacrylate,98%通用试剂　10ML

2-Methoxyethyl acetate,98%通用试剂　100ML

Dimethyl acetylenedicarboxylate,99%通用试剂　5G

Ethyl chlorooxoacetate,98%通用试剂　25G

2-Ethylhexyl nitrate,97%通用试剂　250ML

Triethyl 1,1,2-ethanetricarboxylate,99%通用试剂　5G

Isopropyl acetoacetate,≥99.0%通用试剂　25G

tert-Butyl acetoacetate,98.0%通用试剂　25G