注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
9,17-Octadecadiene-12,14-diyne-1,11,16-triol1,2-二氯乙烷  for HPLC, ≥99.9%气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：380m2/g;粒径：7-40nm

Annacin1,2-二氯乙烷标准熔液 1.20mg/ml，基体：甲疏性气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：115m2/g；粒径

Decanedioic acid1,2-二氯乙烷 for spectroscopy，≥99.8%（GC)气相纳米二氧化硅 99.8%,比表面积（BET）：150m2/g；粒径：7-40n

Falcarindiol1,2-二氯乙烷 分析标准品，≥99.9% (GC)二氧化硅 99.9% metals basis

Falcaril乙基苯 AR,98.5% 二氧化硅 AR

Ginseyne K乙基苯 >99.5%(GC)甲基烯酸二乙基氨基乙酯, 包含100 ppm 吩噻, 99%

Glycerol 1-(26-hydroxyhexacosaate)草酸 CP，99.5%烯酸二甲基氨基乙酯 99%

(R,E)-Deca-2-ene-4,6-diyne-1,8-diol草酸 GR，99.8%甲基烯酸二甲氨乙酯 99%

(S,E)-Deca-2,9-diene-4,6-diyne-1,8-diol2-氯烟酸 98%甲基烯酸异辛酯 99%

(Z)-Lachphyllum lactone1,10-癸二 98%甲基烯酰氧乙基*基氯化铵 75 wt. % in H2O

1,2-Benzenedicarboxylic acid十二烷二酸 99%锆粉 99.95% metals basis ((不包括铪))

1-2-Cyclohexanedione1,2-十六烷二 95%锆粉 99.5% metals basis ((不包括铪)),200 目

1,5-Anhydro-D-glucitol1,8-辛二 98%偶氮二异戊 98%

1,6-Dioxaspiro[4.5]decan-2-methal1,2-十四碳二 90%2,4-二羟基二苯甲酮 99%

1-Chloroindan十四烷二酸 98%2-羟基-4-甲氧基-5-磺酸二苯甲酮 98%

1-Deoxyjirimycin碳酸二乙酯 99%2-羟基-4-正辛氧基二苯甲酮 99%

溴百里香酚蓝Phospho-Estrogen Receptor α (Ser118) (16J4) Mouse mAbphospho-c-Abl(Tyr412)  磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体

溴甲酚紫p190-A RhoGAP Antibodyphospho-c-Abl(Tyr283)  磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体

溴甲酚紫(98%)MTHFR (D1E4V) Rabbit mAbphospho-c-Abl(Tyr276)  磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体

铋试剂Ⅱ(CP)REDD1 Antibodyphospho-c-Abl(Tyr272)  磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体

铋试剂Ⅱ(98%)TGF-β Receptor III Antibodyphospho-c-Abl(Tyr251)  磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体

铍试剂ⅡSUFU (C54G2) Rabbit mAbphospho-c-Abl(Tyr245)  磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体

溴邻苯三酚红SUFU (C54G2) Rabbit mAbphospho-c-Abl(Tyr204)  磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体

溴甲酚绿钠Phospho-p53 (Ser46) Antibodyphospho-c-Abl(Tyr134)  磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体

盐酸副品红Phospho-p53 (Ser46) Antibodyphospho-c-Abl(Thr754)  磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体

二苯胺磺酸钡(CP)CD4 (D7D2Z) Rabbit mAbphospho-c-Abl(Ser735)  磷酸化非受体酪氨酸激酶c-Abl抗体
链霉菌通用PCR检测试剂盒说明书2-Fluorobiphenyl,96%通用试剂　5G

3,5-Dichloroiodobenzene,99%通用试剂　5G

3-Bromoiodobenzene,98%通用试剂　5G

Anti-Human IgM，Purified antibody prod...纯抗体　5MG

2-Bromoiodobenzene,99%通用试剂　1G

4-Iodotoluene,99%通用试剂　25G

2-Iodotoluene,98%通用试剂　25G

3-Bromonitrobenzene,97%通用试剂　25G

2,5-Dimethylbromobenzene,99%通用试剂　25G

1,2-Dibromobenzene,98%通用试剂　5G

2-Bromo-5-methoxytoluene,98%通用试剂　5ML

2,4-Dichloro-1-fluorobenzene,99%通用试剂　5G

3,5-Di-tert-butylbromobenzene,97%通用试剂　1G

1-Bromo-4-fluorobenzene,99%通用试剂　25G

1,4-Diethynylbenzene,96%通用试剂　1G
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。