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详情介绍
试剂盒组成及试剂配制 :
1. 酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2. 标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3. 样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4. 标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5. 辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6. 标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7. 辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9. 浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10. 终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
服务:
公司产品仅用于科研我们可以根据您的应用需要,比如在检测范围、种属以及灵敏度等方面有特殊要求,而量身定制检测试剂盒,有效控制检测试剂成本。并可提供免费代测。
产品名称 | 英文名称 | 规格 | 货号 |
Cath G Ab组织蛋白酶G自身抗体ELISA试剂盒 | Cath G Ab ELISA Kit | 48T/96T | LZ-E028525 |
样品准备:
1)血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2)血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
使用方法:
测定法的灵敏度来自作为报告的酶。酶是一种有机催化剂,很少量的酶即可诱导大量的催化反应,产生可供观察的显色反应现象。因此该体系常被称为酶放大体系。
1. 标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 24μg/ml 5号标准品 150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液
12μg/ml 4号标准品 150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液
6μg/ml 3号标准品 150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液
3μg/ml 2号标准品 150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液
1.5μg/ml 1号标准品 150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液
2. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。|
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4. 如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔*孔的OD值),请先将样本稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui后乘以稀释倍数(×5×n)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.本试剂不同批号组分不得混用。显色剂B请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)试剂盒达卡巴乙二乙 分析标准品, ≥99.8% (GC)水质苯标样 浓度范围:0.9,2.01(mg/L),分析标准品
肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)试剂盒大车前苷硬酯乙酯 97%苯 MDI级,≥99.98%(GC)
肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)试剂盒大豆苷固蓝RR盐 AR苯乙烯 Standard for GC,>99.5%(GC)
肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)试剂盒大豆苷元叶 分析标准品,≥98%苯乙烯 CP,含10-15ppm 4-叔-丁邻苯二酚稳定剂
转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒大豆皂苷Aa固蓝B 90%苯乙烯 99%,含10-15ppm 4-叔-丁邻苯二酚稳定剂
转化生长因子β1(TGF-β1)试剂盒大豆皂苷Ab高铁试剂 98.5%苯乙烯 分析标准品
转化生长因子α(TGF-α)试剂盒大豆皂苷Ac固蓝BB盐 AR苯乙烯标准溶液 1000μg/ml,溶剂:二硫化碳
转化生长因子α(TGF-α)试剂盒大豆皂苷Ba4-氟-3-硝三氟苯 99%苯乙烯标准溶液0.88mg/ml,溶剂:
质衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)试剂盒 大豆皂苷Bb核黄素-5′-磷钠盐水合物 73-79%(HPLC)苯乙烯标准溶液 1000μg/ml
质衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)试剂盒 大豆皂苷Bd戊菊酯 分析标准品,100%叔丁 色谱级,≥99.9% (GC)
干因子受体(SCFR)试剂盒大豆皂苷Be脒盐盐 96%乙苯 >99.5%(GC)
干因子受体(SCFR)试剂盒大豆皂苷Be酯(+)-葑 standard for GC, ≥99.5% (GC)2-丁 ACS, ≥99.0%
干因子/肥大生长因子(SCF/MGF)试剂盒大果桉B for LC-MS, ~98% (T)1,2,4-三苯 98%
干因子/肥大生长因子(SCF/MGF)试剂盒大花羊藿苷F固黑K盐 80%2,5-二 99%
可溶性CD40配体(sCD40L)试剂盒 大黄酚固红 3 GL Biological stain降烯二酐 99%
可溶性CD40配体(sCD40L)试剂盒 大黄酚-8-O-葡萄糖苷固红RC 生化试剂级降烯二酐 95%
Cath G Ab组织蛋白酶G自身抗体ELISA试剂盒产品背景:
细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定和一些疾病发生过程等方面起着十分重要的作用。
在正常细胞中,磷脂酰丝氨suan(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中的磷脂酰丝氨suan(PS)由脂膜内侧翻向外侧。在体内,巨噬细胞可以识别翻转到细胞膜表面的PS 从而将这些程序性死亡的细胞清除,因此凋亡过程中并不伴随局部的炎症反应,而在细胞坏死的过程中则常常伴随着炎症反应。
AnnexinⅤ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的PS 高亲和力特异性结合。PS 外翻发生在细胞核破裂,DNA 片段化以及凋亡相关蛋白出现之前,这使得Annexin V 与PS的结合成为凋亡早期的一种重要检测标志事件。
检测原理:
在正常的活细胞中,磷脂酰丝氨suan(phosphotidylserine,PS)位于细胞膜的内侧,但在早期凋亡的细胞中,PS 从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中。
Annexin-Ⅴ能与PS 高亲和力结合。可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨suan与凋亡早期细胞的胞膜结合。用标记了APC的AnnexinⅤ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。细胞坏死的过程中也会发生细胞膜损伤,坏死的细胞会结合Annexin V-APC。
Annexin V-APC 通常与细胞膜非渗透性核酸荧光染料联合使用以检测凋亡细胞。常用的染料是PI。正常细胞和早期凋亡细胞的细胞膜是完整的,核酸染料PI 不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和坏死细胞,PI 能够透过细胞膜与细胞核结合呈现红色。
PI/Annexin V-APC试剂盒将Annexin Ⅴ与PI匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。坏死细胞可以同时与Annexin V-APC和PI 结合显色,而PI 则被排除在活细胞(APC阴性)和早期凋亡细胞(APC阳性)之外。
Annexin V-APC 细胞凋亡检测试剂盒可以方便快捷的检测凋亡细胞,使用流式细胞仪、荧光显微镜或其它荧光检测设备进行检测。
储存条件:染色液2-8℃避光保存;结合液2-8℃保存;