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详情介绍
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
产品属性:
产品名称 | FN纤维连接蛋白ELISA试剂盒 |
英文名称 | FN ELISA Kit |
产品规格 | 48T/96T |
产品货号 | LZ-E028952 |
需要而未提供的试剂和器材:
1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等。
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
上腺素能α1A受体(ADRA1A)联免疫吸附测定试剂盒硫氮化硅 β-phase,95%,1-3μm桂异酯 ≥96%, FG
脂肪分化相关蛋白(ADRP)联免疫吸附测定试剂盒 硫碳化钛 99%,2-4μm可可 ≥95%,Kosher
白介素20(IL-20)联免疫吸附测定试剂盒硫氮化钛 99.5%,2-10 μm可可 95%
δ样蛋白1同源物(DLK-1)联免疫吸附测定试剂盒兔肌动蛋白碳氮化钛 powder, 1-2 μm, 99% 98%
血管紧张素转化2(ACE2)联免疫吸附测定试剂盒 兔肌动蛋白柠檬铵 AR,98.5%异 99%
骨成型蛋白3(BMP-3)联免疫吸附测定试剂盒 兔肌动蛋白柠檬铵 CP,98%异 ≥98%,FCC
钙磷蛋白(CAPS)联免疫吸附测定试剂盒γ-球蛋白(牛)柠檬铵 GR2-庚 98%
脂肪型脂肪结合蛋白(FABP4)联免疫吸附测定试剂盒 γ-球蛋白(牛)柠檬钙 AR,99%乙薄荷酯 98%
胎蛋白异质体3(AFP-L3)联免疫吸附测定试剂盒 牛胰岛素柠檬,一水 Standard for GC5--2-苯-2-己烯 95%
αL岩藻糖(FUCA)联免疫吸附测定试剂盒 牛胰岛素柠檬,一水 AR,99.5%5--2-苯-2-己烯 ≥95%, Kosher, FG
周期素B(CCNB)联免疫吸附测定试剂盒 牛胰岛素柠檬,一水 99.995% metals basis3-硫 98%
聚集蛋白聚糖(AGC)联免疫吸附测定试剂盒 透明质钠柠檬,一水 GR,99.8%3-戊 99%
晚期糖化终末产物受体(AGER)联免疫吸附测定试剂盒 透明质钠柠檬,一水 ACS, 99.0-102.0%3-戊 ≥98%, FG
CD3d分子(CD3d)联免疫吸附测定试剂盒透明质钠柠檬,一水 Ph. Eur., BP, USP, E330, 99.5-100.5%乙薄荷酯 ≥98%, FCC
前梯度蛋白2(AGR2)联免疫吸附测定试剂盒 透明质钠柠檬 一水 ≥99.9998% metals basis2--4-戊烯 98%
集聚蛋白(AGRN)联免疫吸附测定试剂盒 SDS-PAGE蛋白质超低分子量多肽柠檬 AR,99.5%2--4-戊烯 ≥98%,FCC
FN纤维连接蛋白ELISA试剂盒用途:
螺旋体、幽门螺旋杆菌、真菌、球菌等染色
注意事项:
菌丝及颗粒呈黑色,背景呈棕黄色。染片不易腿色。
储存条件:4℃,避光,3个月