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详情介绍
标本要求:
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。
2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
产品属性:
产品名称 | FCN3纤维胶凝蛋白3ELISA试剂盒 |
英文名称 | FCN3 ELISA Kit |
产品规格 | 48T/96T |
产品货号 | LZ-E028954 |
需要而未提供的试剂和器材:
1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪
2. 高速离心机
3. 电热恒温培养箱
4. 干净的试管和Eppendof管
5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器
6. 蒸馏水,容量瓶等。
备试剂与收集血样:
1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
样本实验前准备:
ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。
(1)血清
室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(2)血浆:
应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(3)尿液:
用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。
(4)细胞培养上清:
检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。
(5)培养细胞
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
(6)组织标本
切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。
操作步骤:
1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。
周期素依赖性激抑制因子3(CDKN3)联免疫吸附测定试剂盒 DNA Marker I苯酯 98%E-2-辛烯 ≥94%,Kosher
血管抑素(ANG)联免疫吸附测定试剂盒 DNA Marker Ⅱ-2,2,2-三乙酯 97%茶香 ≥98%, FG
血管紧张素II (Ang-II)联免疫吸附测定试剂盒 DL2000 DNA Marker-2,2,2-三乙酯 99%桂酯 98%
血管紧张素I(Ang-I)联免疫吸附测定试剂盒 DL3000 DNA Marker2,2,2-三 98%柳苯乙酯 ≥97%,FCC
血管紧张素II受体1(ANG II R1)联免疫吸附测定试剂盒 植物血球凝集素过氧化二异苯 CP,98%茶螺烷 technical, ≥90% (GC,mixture of isomers)
血管紧张素II受体1抗体(ANGⅡR1-Ab)联免疫吸附测定试剂盒 植物血球凝集素PHA-M金属镝 99.9% (REO)柠檬三乙酯 ≥99%, FCC
血管紧张素II受体2(ANGⅡR2)联免疫吸附测定试剂盒 植物血球凝集素PHA-M金属镧 99.9% metals basis2-十三烷 98%
血管生成素4(ANGPT4)联免疫吸附测定试剂盒 植物血球凝集素PHA-M金属镧 99.5%,粉末2-十三烷 ≥96%, Kosher
血管生成素样蛋白1(ANGPTL1)联免疫吸附测定试剂盒 植物血球凝集素PHA-M金属钕 固体颗粒或粉末, 99% metals basis茶螺烷 ≥85%, FG
血管生成素样蛋白2(ANGPTL2)联免疫吸附测定试剂盒 植物血球凝集素PHA-P独石氧化铌 电子级99.98%2,3,5,6-四吡 分析标准品,98%
血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)联免疫吸附测定试剂盒 植物血球凝集素PHA-P高纯氧化铌 光玻级99.99%2,3,5,6-四吡 98%
血管生成素样蛋白4(ANGPTL4)联免疫吸附测定试剂盒 植物血球凝集素PHA-P氧化铌 AR,99.9%2,3,5,6-四吡 ≥98%, Kosher, FG
血管生成素样蛋白6(ANGPTL6)联免疫吸附测定试剂盒 植物血球凝集素PHA-P氧化铌 99.95%,冶金级乙香兰素酯 98%
血管生成素受体Tie1(ANG-R-Tie1)联免疫吸附测定试剂盒色素C氧化铌 SP异丁香兰素酯 ≥98%, FG
血管生成素受体Tie2(ANG-R-Tie2)联免疫吸附测定试剂盒色素C碳化铌 99%,2-4μm乙香兰素酯 ≥98%,Kosher
髓鞘相关糖蛋白(MAG)联免疫吸附测定试剂盒 色素C氟钽 99.7%天然香兰素 Natural,≥99%, FCC, FG
FCN3纤维胶凝蛋白3ELISA试剂盒用途:
乙肝病毒/HBV染色
注意事项:
维多利蓝染色液比较稳定,室温可放置3-4年,并可反复使用。肝细胞内的HBsAg阳性物质呈蓝色,弹性纤维、脂褐素、肥大细胞也染蓝色,胞核呈红色。不着染胆色素。
储存条件:室温,避光,12个月