详情介绍
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-CEP104
中文名称 CEP104抗体
别 名 CE104_HUMAN; Centrosomal protein of 104 kDa; Cep104; GlyBP; Glycine Binding Protein; glycine-, glutamate- and thienylcyclohexylpiperidine-binding protein; KIAA0562; LOC246295.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 神经生物学 信号转导
蛋白分子量 predicted molecular weight: 104kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CEP104 (265-540aa)
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
鸡丝氨蛋白酶1(PRSS1)酶联免疫吸附测定试剂盒1,5-萘二磺,四水犁黑轮斑交链孢霉拉丁属名: Meyerozyma guilliermondii
鸡无孢蛋白(ASPN)酶联免疫吸附测定试剂盒1,5-萘二磺,四水季也蒙迈耶氏酵母拉丁属名: jejuni
鸡水通道蛋白2(AQP-2)酶联免疫吸附测定试剂盒 1,5-萘二磺,四水空肠弯曲杆菌拉丁属名: Aspergillus usamii
鸡P选择素(SELP)酶联免疫吸附测定试剂盒脒硫脲宇佐美曲霉注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)酶联免疫吸附测定试剂盒脒硫脲贝氏葡萄座腔菌拉丁属名: Pseudomonas pseudoalcaligenes
鸡磷脂酶B(PLB)酶联免疫吸附测定试剂盒脒硫脲类产假单胞菌拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
鸡唾液结合免疫球蛋白样凝集素12(SIGLEC12)酶联免疫吸附测定试剂盒Dalcetrapib酿酒酵母拉丁属名: Lysobacter spongiicola
鸡神经型一氧化氮合酶(NOS1/nNOS)酶联免疫吸附测定试剂盒WHI-P154居海绵溶杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡胰高血糖素(GC)酶联免疫吸附测定试剂盒 L-谷氨-15N毛柄金钱菌(金针菇)拉丁属名: Streptomyces flavospinosporus
鸡组织蛋白酶K(CTSK)酶联免疫吸附测定试剂盒 L-谷氨-15N黄色孢链霉菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡V型胶原α2(COL5α2)酶联免疫吸附测定试剂盒 FMOC-L-3-氨总状共头霉拉丁属名: Streptomyces anulatus
鸡可溶性腺苷环化酶(sAC)酶联免疫吸附测定试剂盒FMOC-L-3-氨环圈链霉菌拉丁属名: Penicillium resedanum McLennan
鸡凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)酶联免疫吸附测定试剂盒FMOC-L-2-氨木犀青霉拉丁属名: Staphylococcus sp.
鸡白介素1α(IL-1α)酶联免疫吸附测定试剂盒异噁唑-5-葡萄球菌属拉丁属名: Pseudomonas syringae
鸡α谷胱甘肽S转移酶(α-GST)酶联免疫吸附测定试剂盒异噁唑-5-丁香假单胞菌拉丁属名: Streptomyces malaysiensis
鸡11去氢血栓烷B2(11-DH-TXB2)酶联免疫吸附测定试剂盒 异噁唑-5-马来西亚链霉菌拉丁属名: Sanghuangporus baumii
CEP104抗体鸡淋巴功能相关抗原2(LFA-2/CD2)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 荧光素标记NK抑制性受体3DL1抗体IgG
鸡嗜铬蛋白B(CgB)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-CD158e/KIR3DL1/FITC 荧光素标记NK抑制性受体3DL1抗体IgG
鸡胎盘碱性磷酸酶(PLAP/ALPP)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-CD158i/KIR2DS4/FITC 荧光素标记NK抑制性受体2DS4抗体IgG
鸡Apelin 36(AP36)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-CD147/EMMPRIN/FITC 荧光素标记外质金属蛋白酶诱导因子抗体IgG
鸡蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M2(M-AChRM2)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CD151/MER2/PETA-3/FITC 荧光素标记CD151抗体IgG
鸡免疫球蛋白G3(IgG3)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CD155/PVR/FITC 荧光素标记CD155抗体IgG
鸡TATA框结合蛋白/TBP相关因子(TAF)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CD160/By55/FITC 荧光素标记NK受体BY55抗体IgG
鸡GATA结合蛋白1(GATA1)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CD161/NK1.1/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠CD161抗体IgG