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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-C9orf71
中文名称 C9orf71抗体
别 名 C9orf71; Chromosome 9 open reading frame 71; TM252_HUMAN; MGC34760; RP11-274B18.1; TMEM252; Transmembrane protein 252; Transmembrane protein C9orf71.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 19kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C9orf71
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
鸡白介素2受体α(IL-2Rα/CD25)酶联免疫吸附测定试剂盒氘代苯-d8长双歧杆菌长亚种拉丁属名: Pholiota nameko
鸡血清素转运体(SERT)酶联免疫吸附测定试剂盒氘代苯-d8滑菇拉丁属名: Bacillus subtilis
鸡巨噬炎性蛋白5(MIP-5)酶联免疫吸附测定试剂盒3-苯硫酚枯草芽孢杆菌拉丁属名: Lactobacillus plantarum subsp. plantarum
鸡趋化因子CXC配体16 (CXCL16)酶联免疫吸附测定试剂盒3-苯硫酚植物乳杆菌植物亚种拉丁属名: coli
鸡胃动素(MTL)酶联免疫吸附测定试剂盒3-苯硫酚大肠埃希菌拉丁属名: Pseudomonas putida
鸡单核趋化蛋白1(MCP-1)酶联免疫吸附测定试剂盒2H-1,3-苯并噁-2,4(3H)-二假单胞菌拉丁属名: Chitinophaga pinensis
鸡鞘磷脂(SM/SPH)酶联免疫吸附测定试剂盒 2H-1,3-苯并噁-2,4(3H)-二松树噬几丁质菌拉丁属名: Enterococcus faecalis
鸡XVII型胶原(COL17)酶联免疫吸附测定试剂盒2-氨乙吗啉粪肠球菌拉丁属名: Beauveria bassiana
鸡丝氨蛋白酶23(PRSS23)酶联免疫吸附测定试剂盒2-氨乙吗啉球孢白僵菌拉丁属名: Aspergillus carbonarius
鸡维生素D受体(VDR)酶联免疫吸附测定试剂盒Fmoc-L-beta-高谷氨 6-叔丁酯炭黑曲霉拉丁属名: septicum
鸡黑色素瘤转移表面黏附分子(MMSAM)酶联免疫吸附测定试剂盒3-苯梭菌拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae Hansen
鸡剪切修复交叉互补因1(ERCC1)酶联免疫吸附测定试剂盒 3-苯酿酒酵母拉丁属名: Penicillium urticae Bainier
鸡衰老关键蛋白4(FBLN4)酶联免疫吸附测定试剂盒N-Boc-4,4-二氟-L-脯氨酯荨麻青霉拉丁属名: suis
鸡CCAAT增强子结合蛋白δ(C/EBPδ)酶联免疫吸附测定试剂盒 N-Boc-反式-4-氟-L-脯氨酯猪链球菌用途: 用于抗虫因的分离和抗虫相关础研究。
鸡腺苷环化酶2(ADCY2)酶联免疫吸附测定试剂盒 N-Boc-反式-4-氟-L-脯氨酯苏云金芽胞杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡肌钙蛋白C2 (TNNC2)酶联免疫吸附测定试剂盒4-溴代苯乙烯葡萄座腔菌拉丁属名: 非无菌药品 耐胆盐革兰阴性菌(阴性)
C9orf71抗体鸡色素P450氧化还原酶(CPR)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-CBL2 /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗体IgG
鸡周期素依赖性激酶抑制因子3(CDKN3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-phospho-CBL2(Tyr731) /FITC 荧光素标记磷酸化原癌蛋白CBL2抗体IgG
鸡CXC趋化因子受体1(CXCR1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-phospho-CBL2(Tyr774) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化原癌蛋白CBL2抗体IgG
鸡轴突生长诱向因子1(Ntn1)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CBP/FITC 荧光素标记CREB结合蛋白抗体IgG
鸡抗胰岛素受体抗体(AIRA)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-CBX3/FITC 荧光素标记染色盒同源物3抗体IgG
鸡γ谷氨酰转移酶1(γGT1)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CBX5/FITC 荧光素标记CBX5抗体IgG
鸡半乳凝集素12(GAL12)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-Cbx8/FITC 荧光素标记染色质结合蛋白Cbx8抗体IgG
鸡BCL2修饰因子(BMF)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-CC16/FITC 荧光素标记克拉拉蛋白(Clara分泌蛋白)抗体IgG