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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-C9orf40
中文名称 C9orf40抗体
别 名 C9orf40; Chromosome 9 open reading frame 40; CI040_HUMAN; FLJ10110; FLJ25795; Hypothetical protein LOC55071; Uncharacterized protein C9orf40.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 21kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C9orf40
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
鸡尿激酶型纤溶酶原激活因子受体(PLAUR/uPAR)酶联免疫吸附测定试剂盒FMOC-D-4-溴苯氨光帽磷伞注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡蛋白酪氨磷酶受体J(PTPRJ)酶联免疫吸附测定试剂盒苝芽胞杆菌用途: 小种7号,研究用
鸡血红素氧化酶2(HO2)酶联免疫吸附测定试剂盒 苝尖镰孢黄瓜专化型(黄瓜枯萎病菌)拉丁属名: Kluyveromyces dobzhanskii
鸡多形核白弹性蛋白酶(PMN Elastase)酶联免疫吸附测定试剂盒苝多布克鲁维酵母用途: 害虫生物防治
鸡生长分化因子7(GDF7)酶联免疫吸附测定试剂盒二烯新戊二酯白僵菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡钙网蛋白(CRT)酶联免疫吸附测定试剂盒 二烯新戊二酯樟疫霉拉丁属名: Acetobacter aceti
鸡黑素转铁蛋白(MFI2)酶联免疫吸附测定试剂盒Fmoc-L-2-苯氨醋化醋杆菌拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
鸡泛素分解酶(DUB)酶联免疫吸附测定试剂盒 Fmoc-L-2-苯氨酿酒酵母拉丁属名: Janibacter melonis
鸡脑多巴神经营养因子(CDNF)酶联免疫吸附测定试剂盒 FMOC-L-4-溴苯氨柠檬两面神菌拉丁属名: Streptomyces thermolineatus
鸡免疫球蛋白E Fc段受体II(FcεR II)酶联免疫吸附测定试剂盒 FMOC-L-4-溴苯氨热线链霉菌用途: 植物病原物,用于种群的遗传学研究和炭疽病害的诊断和防治
鸡β淀粉样前体蛋白(βAPP)酶联免疫吸附测定试剂盒FMOC-L-4-溴苯氨胶孢拉丁属名: Pyrenochaetopsis microspora
鸡嗜中性粒防御素α1(DEFα1)酶联免疫吸附测定试剂盒FMOC-L-炔甘氨小孢拟棘壳孢拉丁属名: Pseudidiomarina sediminum
鸡成骨生长肽(OGP)酶联免疫吸附测定试剂盒 FMOC-L-炔甘氨沉积物假海源杆菌拉丁属名: Bacillus subtilis
鸡低分子肝素(LMWH)酶联免疫吸附测定试剂盒 烟-N-氧化物枯草芽孢杆菌拉丁属名: Roseovarius mucocus
鸡尾型同源盒转录因子(CDX2)酶联免疫吸附测定试剂盒烟-N-氧化物黏着玫瑰变色菌用途: 生物防治
鸡血小板亲和蛋白1(PKP1)酶联免疫吸附测定试剂盒D-苯甘氨酯盐盐球孢白僵菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
C9orf40抗体鸡核孔蛋白35kda(NUP35)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-BRAF/FITC 荧光素标记黑素瘤相关蛋白抗体IgG
鸡封闭蛋白3(CLDN3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-B Raf(phospho S365) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化B-Raf抗体IgG
鸡白分化抗原CD40配体(CD40L/TNFSF5)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-phospho-B-Raf (Ser445)/FITC 荧光素标记磷酸化B-Raf抗体IgG
鸡白三烯E4(LTE4)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-phospho-B-Raf (Ser601) /FITC 荧光素标记磷酸化B-Raf抗体IgG
鸡新蝶呤 (Neopterin)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-BRCA1(human)/FITC 荧光素标记癌易感因1抗体(人)IgG
鸡蛋白激酶C-γ(PKCγ)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-BRCA1(mouse rat)/FITC 荧光素标记癌易感因1抗体(小鼠 大鼠)IgG
鸡钙调素(CAM)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-BRCA1(Phospho Ser1524) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化癌易感因1抗体IgG
鸡谷胱甘肽S-转移酶α1(GSTα1)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-BRCA2/FITC 荧光素标记癌易感因2抗体IgG