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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-C8orf33
中文名称 C8orf33抗体
别 名 Chromosome 8 open reading frame 33; Hypothetical protein LOC65265; UPF0488 protein C8orf33;CH033_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 25kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C8orf33
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
鸡脑源性神经营养因子(BDNF) 酶联免疫吸附测定试剂盒2-溴茴香硫运动发酵单胞菌运动亚种拉丁属名: Nocardioides alpinus
鸡质金属蛋白酶原10 (Pro-MMP-10)酶联免疫吸附测定试剂盒2-溴茴香硫诺卡氏菌属注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡弹性蛋白酶2B(ELA2B)酶联免疫吸附测定试剂盒 3,5-二并噻吩黄单胞菌拉丁属名: Geobacillus stearothermophilus
鸡磷肌-3-激酶催化亚σ肽(PIK3Cσ)酶联免疫吸附测定试剂盒3,5-二并噻吩嗜热脂肪地球芽胞杆菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡叉头框蛋白O2(FOXO2)酶联免疫吸附测定试剂盒2,4-二-5-氧嘧啶盘长孢状盘孢拉丁属名: 冻干粉 肠道出血性大肠埃希氏菌
鸡中脑星型胶质来源神经营养因子(MANF)酶联免疫吸附测定试剂盒 2,4-二-5-氧嘧啶冻干粉 肠道出血性大肠埃希氏菌(EHEC)(阳性)拉丁属名: Bacillus subtilis subsp. subtilis
鸡状旁腺激素样蛋白(PLP)酶联免疫吸附测定试剂盒2,4-二-5-氧嘧啶枯草芽孢杆菌枯草亚种注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡前列腺素I合酶(PTGIS)酶联免疫吸附测定试剂盒8-氨芘-1,3,6-三磺三钠盐(APTS)假单胞菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡S100钙结合蛋白A9(S100A9)酶联免疫吸附测定试剂盒4,4'-二羟二苯黄硬皮马勃注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡衰变加速因子(DAF)酶联免疫吸附测定试剂盒 4,4'-二羟二苯粉红单端孢霉用途: 试验栽培
鸡神经调节蛋白2(NRG-2)酶联免疫吸附测定试剂盒3-溴-5-光帽磷伞拉丁属名: Bacillus subtilis
鸡芳硫酯酶A(ARSA)酶联免疫吸附测定试剂盒 3-溴-5-枯草芽孢杆菌拉丁属名: Polyangium fumosum
鸡胰岛素受体(INSR)酶联免疫吸附测定试剂盒3,3'-亚二吲哚Polyangium fumosum 拉丁属名: Bacillus psychrosaccharolyticus
鸡纤调蛋白(FMOD)酶联免疫吸附测定试剂盒 3,3'-亚二吲哚冷解糖芽孢杆菌拉丁属名: Prevola copri
鸡神经髓鞘蛋白(p2)酶联免疫吸附测定试剂盒 PQ 401普氏菌注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡Sp100核抗原(Sp100)酶联免疫吸附测定试剂盒 4-叔丁苄多主葡萄壳菌拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
C8orf33抗体鸡鸟苷酸环化酶激活因子2A(GUCA2A)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-Bcl-10/CLAP/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠Bcl-10抗体IgG
鸡血小板反应蛋白4(TSP-4)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-Bcl-10(phospho Ser218)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化Bcl-10抗体IgG
鸡半胱氨酰白三烯受体1(CYSLTR1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-Bcr/CD3D/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠T淋巴受体抗体IgG
鸡游离血红蛋白(f-Hb)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-Phospho-Bcr(p-Tyr177)/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠磷酸化T淋巴受体抗体IgG
鸡原钙黏素β16(PCDHβ16)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-BCRP/ABCG2/BXP-21 /FITC 荧光素标记三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2抗体IgG
鸡肌球蛋白轻链激酶(MLCK/MYLK)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-Bdkrb2/B2R/FITC 荧光素标记缓激肽B2受体抗体IgG
鸡IV D组磷脂酶A2(PLA2G4D)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-BDNF/FITC 荧光素标记BDNF蛋白抗体IgG
鸡周期素D2(CCND2)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-BECN1/FITC 荧光素标记一种抑癌因抗体IgG