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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-C8orf47
中文名称 C8orf47抗体
别 名 C8orf47; CH047_HUMAN; Chromosome 8 open reading frame 47; Uncharacterized protein C8orf47.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 40kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C8orf47
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
鸡甘露糖结合蛋白(MBP/MBL)酶联免疫吸附测定试剂盒 5-溴-2-苯酚假单胞菌用途: 生防
鸡血小板衍生生长因子亚B(PDGFB)酶联免疫吸附测定试剂盒5-溴-2-苯酚纤细白僵菌拉丁属名: Natronorubrum aibiense
鸡促性腺激素释放激素(GnRH)酶联免疫吸附测定试剂盒 乙六氟戊二酰艾比湖嗜盐红菌拉丁属名: Bacillus thuringiensis
鸡受体TNFRSF结合丝氨苏氨激酶2(RIPK2)酶联免疫吸附测定试剂盒乙六氟戊二酰苏云金芽孢杆菌拉丁属名: Pseudomonas kunshanensis sp/ Nov/
鸡半乳凝集素2(GAL2)酶联免疫吸附测定试剂盒一氧化异戊二烯Pseudomonas用途: 对水稻稻瘟病有防治效果
鸡c-jun酶联免疫吸附测定试剂盒2-腺嘌呤庆丰链霉菌拉丁属名: Rummeliibacillus stabekisii
鸡丝裂原激活蛋白激酶激酶6(MAP2K6/MKK6)酶联免疫吸附测定试剂盒2-腺嘌呤Rummeliibacillus stabekisii注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
鸡Ⅲ型前胶原羧端原肽(PⅢCP)酶联免疫吸附测定试剂盒4-(苄氧羰)苯黑木耳拉丁属名: Bacillus subtilis
鸡胰腺再生蛋白4(REG4)酶联免疫吸附测定试剂盒4-(苄氧羰)苯枯草芽孢杆菌拉丁属名: Rhizopus chinensis
鸡β内啡肽(β-EP)酶联免疫吸附测定试剂盒 腺苷-5'-磷华根霉拉丁属名: Staphylococcus aureus Rosenbach
鸡C4结合蛋白α(C4BPα)酶联免疫吸附测定试剂盒 腺苷-5'-磷金黄色葡萄球菌*用途: 试验栽培
鸡骨桥素(OPN)酶联免疫吸附测定试剂盒2-羟-4-正辛氧二苯杏鲍菇拉丁属名: Pseudomonas aeruginosa(Schroeter) Migula
鸡心肌肌钙蛋白I(cTn-I/TNNI3)酶联免疫吸附测定试剂盒2-羟-4-正辛氧二苯铜绿假单胞菌(绿脓杆菌)拉丁属名: 乳菌计数质控样品
鸡骨髓前体抑制因子1(MPIF-1/CCL23)酶联免疫吸附测定试剂盒2-羟-4-正辛氧二苯乳菌计数质控样品拉丁属名: Mucor circinelloides f. circinelloides
鸡信号识别颗粒(SRP9)酶联免疫吸附测定试剂盒 (4S)-(-)-异-5,5-二苯-2-恶唑烷卷枝毛霉卷枝变型拉丁属名: Aspergillus terricola Marchal
鸡特异性巨噬武装因子(SMAF)酶联免疫吸附测定试剂盒 氨六甘单栖土曲霉拉丁属名: Candida albicans
C8orf47抗体豚鼠凝血酶原(PT)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-ADRB1/FITC 荧光素标记肾上腺素能受体β1抗体IgG
豚鼠重组激活因1(RAG-1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-ADRB2/FITC 荧光素标记肾上腺素能受体β2抗体IgG
豚鼠α甘露糖苷酶(α Manase)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-ADRB2(phospho Ser346)/FITC 荧光素标记磷酸化肾上腺素能受体β2抗体IgG
豚鼠粒集落激因子受体(GCSFR)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-ADRB2/RBITC 罗丹明标记肾上腺素能受体β2抗体IgG
豚鼠β内酰酶抑制剂(BLI)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-ADRB3/ Beta3-AR /RBITC 罗丹明标记肾上腺素能受体β3抗体IgG
豚鼠载脂蛋白A1(ApoA1)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-ADRB3/ Beta3-AR /FITC 荧光素标记肾上腺素能受体β3抗体IgG
豚鼠肺部活化调节趋化因子(PARC/CCL18)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-CD8/RBITC 罗丹明标记CD8抗体IgG
豚鼠热休克蛋白90(HSP-90)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-AD7C/FITC 荧光素标记神经丝蛋白抗体IgG