详情介绍
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-C11orf74
中文名称 11号染色体开放阅读框74抗体说明书
别 名 Chromosome 11 open reading frame 74; FLJ38678; HEPIS; Hypothetical protein LOC119710; Protein HEPIS; CK074_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗
研究领域 心血管 细胞生物 免疫学 神经生物学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 25kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C11orf74
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
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人Apelin-12 Human Apelin-12 ELISA Kit 规格: 96T/48T 原装、分装
人活化蛋白C Human Acti-vated protein C ELISA Kit 规格: 96T/48T 原装、分装
人ATP酶 Human Adenosinetriphosphatase ELISA Kit 规格: 96T/48T 原装、分装
人Aβ1-40蛋白 Human Aβ1-40 protein ELISA Kit 规格: 96T/48T 原装、分装
人Aβ1-42蛋白 Human Aβ1-42 protein ELISA Kit 规格: 96T/48T 原装、分装
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大鼠质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)ELISA试剂盒 规格:96T/48T
大鼠质细胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA试剂盒 规格:96T/48T
大鼠己糖激酶(HK)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠甲种胎儿球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA试剂盒规格:96T/48T
大鼠甲状旁腺激素(PTH) ELISA试剂盒 规格:96T/48T
大鼠甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP) ELISA试剂盒 规格:96T/48T
大鼠甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒规格:96T/48T
11号染色体开放阅读框74抗体说明书猪大肠癌专一抗原3(CCSA-3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-TLR4/FITC 荧光素标记Toll样受体4抗体IgG
猪二氢嘧啶酶样蛋白3(DPYSL3)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-TLR5/CD285 /FITC 荧光素标记Toll样受体5抗体IgG
猪蛋白激酶C-γ(PKCγ)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-TLR6/CD286/FITC 荧光素标记Toll样受体6抗体IgG
猪胰岛素样生长因子酸不稳定亚(IGFALS)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-TLR9/CD289/FITC 荧光素标记Toll样受体9抗体IgG
猪金属硫蛋白1M (MT1M)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-TLR11/FITC 荧光素标记Toll样受体11抗体IgG
猪胆绿素还原酶B(BLVRB)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-TM/FITC 荧光素标记血栓调节蛋白抗体IgG
猪抗乙酰胆碱受体抗体(Anti-AChR)酶联免疫吸附测定试剂盒Anti-TM/Biotin 生物素化血栓调节蛋白抗体IgG
猪糖蛋白V(GP5)酶联免疫吸附测定试剂盒 Anti-TNF- Alpha /Gold 胶体金离子标记肿瘤坏死因子抗体