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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
公司抗体仅用于科研现货供应,质量有保证、*、实验效果好,同时我司为您提供新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明,欢迎前来选购!
英文名称 Anti-Calponin 1/2/3
中文名称 钙结合蛋白Calponin抗体科研抗体
别 名 smooth muscle; Basic calponin; Calponin 1; Calponin 2; Calponin 3; Calponin1; Calponin2; Calponin3; Calponin-1; Calponin-2; Calponin-3; Calponin 1 basic smooth muscle; Calponin H1; Calponin H1 smooth muscle; Calponins basic; CNN 1; Cnn1; CNN2_HUMAN; Sm Calp; SMCC.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
产品类型 一抗
研究领域 心血管 细胞生物 信号转导 干细胞 结合蛋白 细胞类型标志物 细胞骨架
蛋白分子量 predicted molecular weight: 34kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Calponin 1/2/3
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
小根蛋白(ROLT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)榆黄蘑鸡异线虫探针法荧光定量PCR试剂盒
肉碱转运蛋白2(CT2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)深色壳囊孢禽腺病E型探针法荧光定量PCR试剂盒
冠蛋白7(CORO7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)蝉花乙型肝炎病H型探针法荧光定量PCR试剂盒
冠蛋白1A(CORO1A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)水生黄杆菌鸭源鸡杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
冠蛋白1B(CORO1B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)皮生毛霉马虻探针法荧光定量PCR试剂盒
冠蛋白1C(CORO1C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)黑根霉杜克雷嗜血杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
冠蛋白2A(CORO2A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)芽殖球菌属豚鼠疱疹病探针法荧光定量PCR试剂盒
冠蛋白2B(CORO2B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)孢小克银汉霉轮生变种猪嗜血杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
Citron蛋白(CIT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)枯草芽胞杆菌猪螺杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
胆碱脱氢酶(CHDH)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)乳酸乳球菌叶蝉亚种嗜冷黄杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒
几丁质酶1(CHIT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)酿酒酵母禽疱疹病2型探针法荧光定量PCR试剂盒
酸性几丁质酶(CHIA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)杂硅盐矿物节杆菌乙型肝炎病A型探针法荧光定量PCR试剂盒
无脉络膜蛋白(CHM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)弯孢菌尼氏单孢子虫探针法荧光定量PCR试剂盒
胆碱磷酸转移酶1(CHPT1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)枯草芽孢杆菌弗朗西斯菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒
糖磺转移酶1(CHST1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)绿色糖单孢菌大片吸虫通用探针法荧光定量PCR试剂盒
钙结合蛋白Calponin抗体科研抗体猪核孔蛋白98kda(NUP98)酶联免疫吸附测定试剂盒永生化人晶状体上皮Anti-LYVE-1/FITC 荧光素标记淋巴管内皮透明质酸受体抗体
猪成纤维生长因子受体底物2(FRS2)酶联免疫吸附测定试剂盒人直肠腺癌Anti-M2-PK /FITC 荧光素标记酮酸激酶-M2抗体IgG
猪转录激活因子7(ATF7)酶联免疫吸附测定试剂盒 人直肠腺癌上皮Anti-M2-PK /FITC 荧光素标记酮酸激酶-M2(小鼠来源抗体)IgG
猪信号识别颗粒(SRP9)酶联免疫吸附测定试剂盒 人胃肠道间质瘤Anti-Phospho-PKM2 (Tyr105) /FITC 荧光素标记磷酸化酮酸激酶M2抗体IgG
猪核孔蛋白35kda(NUP35)酶联免疫吸附测定试剂盒人骨髓增生异常综合征株Anti-Mad1/FITC 荧光素标记Mad1抗体IgG
猪集落激因子2受体α (CSF2Rα)酶联免疫吸附测定试剂盒人小脑颗粒Anti-MAdCAM-1/FITC 荧光素标记粘膜血管定居因子抗体IgG
猪烟酰腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶5(NOX5)酶联免疫吸附测定试剂盒人脑微血管内皮Anti-MAdCAM-1/Biotin 生物素标记粘膜血管定居因子抗体IgG
猪抗麦胶蛋白/麦溶蛋白抗体(AGA)酶联免疫吸附测定试剂盒 人肾小球系膜Anti-Mafa/FITC 荧光素标记v-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌因同源物A抗体()IgG