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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-CASKIN2
中文名称 皮肤相互作用蛋白2抗体科研抗体
别 名 ANKS5B; CASK interacting protein 2; caskin2; CSKI2_HUMAN; FLJ21609; KIAA1139.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 127kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CASKIN2
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
Papilin蛋白(PAPLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人脑星型胶质正常类马链球菌重楼皂苷 Ⅱ
Palmdelphin蛋白(PALMD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大鼠鼻咽癌桃中田壳小圆孢菌L-甘-甘-异白三肽
磷酸核糖咪唑羧化酶(PAICS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大鼠腹膜间皮类干酪乳杆菌甘氨酸甲酯盐酸盐
耐氧化性能蛋白1(OXR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人外周血单核抗生链霉菌正丙醇
卵质酶2(OVCH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人Burkitt's淋巴瘤荧光假单胞菌月桂酸
卵质酶1(OVCH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人神经胶质母出芽短梗霉甲酸钠
耳锚蛋白(OTOA)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人巨白血病株香菇高良姜素
耳胶蛋白(OTOG)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)视网膜Muller干三隔镰刀菌菊苣酸
耳蝶呤3(OTOP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠B淋巴瘤天格尔黄杆菌连翘酯苷A
耳蝶呤2(OTOP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠肾癌柑橘藻斑病*花旗松素
耳蝶呤1(O)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人类动脉内皮纺锤形赖氨酸芽孢杆菌氨甲环酸
耳蜗蛋白(OTOS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人正常结肠上皮空泡单胞菌抗g-氨基丁酸B2受体抗体流式免疫组化
O-唾液酸糖蛋白内肽酶(OSGEP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠视网膜神经节株地衣芽孢杆菌L-甘-缬二肽
骨调蛋白(OMD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人正常胰腺导管上皮食蔗糖葡糖酸醋杆菌2-丁酮酸
耳椎蛋白90(OC90)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人微血管内皮酿酒酵母氯化锌
皮肤相互作用蛋白2抗体科研抗体猪可溶性因子受体(sCKR)酶联免疫吸附测定试剂盒人卵巢颗粒Anti-lamin B/FITC 荧光素标记核纤层蛋白B抗体IgG
猪G蛋白偶联受体37(GPR37)酶联免疫吸附测定试剂盒人肝卵圆Anti-lamin C/FITC 荧光素标记核纤层蛋白C抗体IgG
猪成纤维生长因子19( FGF19)酶联免疫吸附测定试剂盒小鼠胚胎成骨前体Anti-Phospho-Lamin A/C (Ser22) /FITC 荧光素标记磷酸化核纤层蛋白A/C抗体IgG
猪单核趋化蛋白2(MCP-2/CCL8)酶联免疫吸附测定试剂盒小鼠髓样癌Anti-LAIR-1/CD305/FITC 荧光素标记白相关免疫球蛋白样受体1抗体IgG
猪纤溶酶-抗纤溶酶复合物(PAP)酶联免疫吸附测定试剂盒人卵巢良性肿瘤Anti-LAIR-2/CD306/FITC 荧光素标记白相关免疫球蛋白样受体2抗体IgG
猪IV D组磷脂酶A2(PLA2G4D)酶联免疫吸附测定试剂盒人宫颈永生化鳞状Anti-Langerin/CD207/FITC 荧光素标记白分化抗原CD207抗体IgG
猪乙酰胆碱酯酶关联蛋白(ACHAP)酶联免疫吸附测定试剂盒 小鼠骨肉瘤Anti-LAMA3/Laminin 5 alpha 3/FITC 荧光素标记层粘蛋白α3抗体IgG
猪甘露糖凝集素受体(MBLR)酶联免疫吸附测定试剂盒 人星形胶质Anti-LAP18/stathmin/FITC 荧光素标记白血病相关蛋白18/癌蛋白18抗体IgG