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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-C17orf42
中文名称 17号染色体开放阅读框42抗体科研抗体
别 名 Chromosome 17 open reading frame 42; FLJ22729; Hypothetical protein LOC79736; MGC24674; UPF0629 protein C17orf42; TEFM_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 免疫学 信号转导 表观遗传学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 38kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C17orf42
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
染色框同源物1(CBX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大鼠动脉平滑肌Flavobacterium党参炔苷
阻抑素2(PHB2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人胚胎肠粘膜来源微红微球菌6,7-二甲氧基
Bassoon蛋白(BSN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人转移性小叶癌根瘤菌属4'-去甲基鬼臼素
小脑肽3(CBLN3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠视网膜内皮粪产碱菌粪亚种同源盒基因的一种Anti-HOXc8
小脑肽2(CBLN2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大鼠回肠异常毕赤酵母抑制素α抗体流式免疫组化
小脑肽1(CBLN1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人脊索瘤大肠埃希氏菌DL-苯
磷酸甘油酸酯激酶2(PGK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大鼠肝癌(wistar大鼠)气生马赛菌D-色氨酸
ADP核糖转移酶5(ART5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)鸡肝癌褐橙指孢囊菌L-甘-谷二肽
ADP核糖转移酶1(ART1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人气管平滑肌鸭疫里氏杆菌D-亮氨酸甲酯盐酸盐
肽酶抑制因子15(PI15)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠肺微血管内皮灰色链霉菌N-乙酰-L-脯氨酸
丝氨酸蛋白酶21(PRSS21)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)仓鼠beta胰岛胶冻样芽胞杆菌葡萄糖氧化酶
丝氨酸蛋白酶7(PRSS7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人高转移性癌沙福芽孢杆菌透明质酸酶
鞘磷脂合酶2(SGMS2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人永生化支气管上皮海小单孢菌n-辛基-β-D-吡喃葡萄糖苷
色酸羟化酶1(TPH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人慢性淋巴白血病阿氏芽孢杆菌2′-脱氧鸟苷
色酸羟化酶2(TPH2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人支气管上皮样木荷生德克斯酵母乙二四乙酸二钠镁盐四水物
17号染色体开放阅读框42抗体科研抗体猪免疫球蛋白E Fc段受体I(FcεR I)酶联免疫吸附测定试剂盒 人淋巴母瘤Anti-IL-31/FITC 荧光素标记白介素31抗体IgG
猪衰老关键蛋白5(FBLN5)酶联免疫吸附测定试剂盒人正常胃黏膜上皮Anti-IL-31RA/CRL3/FITC 荧光素标记白介素31受体a抗体IgG
猪抗磷脂酰丝氨酸抗体(APSA)酶联免疫吸附测定试剂盒 大鼠肾小管上皮Anti-IL-32/NK4/FITC 荧光素标记白介素32抗体IgG
猪多巴受体D3(D3R/DRD3)酶联免疫吸附测定试剂盒小鼠高转移性癌Anti-IL-33/NFHEV/FITC 荧光素标记白介素33抗体IgG
猪膀胱肿瘤抗原(BTA)酶联免疫吸附测定试剂盒 大鼠结缔组织成纤维Anti-IL-33/FITC 荧光素标记白介素33抗体IgG
猪大脑糖原磷酸化酶(PYGB)酶联免疫吸附测定试剂盒人大肺癌Anti-ILK-1/FITC 荧光素标记整合素连接激酶-1抗体IgG
猪染色质区解旋酶DNA结合蛋白5(CHD5)酶联免疫吸附测定试剂盒上皮样生长的单层Anti-ILT2/CD85j/FITC 荧光素标记表面免疫球蛋白样转录因子2抗体IgG
猪Toll样受体2(TLR2)酶联免疫吸附测定试剂盒小鼠多巴能神经Anti-ILTV/FITC 荧光素标记抗鸡传染性喉气管炎病抗体IgG