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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-CBLL1/Ecadherin binding protein E7
中文名称 上皮钙粘附分子结合蛋白E7说明书
别 名 c-Cbl-like protein 1; CasBrM (murine) ecotropic retroviral transforming sequencelike 1; Casitas B-lineage lymphoma transforming sequence-like protein 1; Casitas B-lineage lymphoma-like 1; Casitas B-lineage lymphoma-transforming sequence-like protein 1; cbll1; E3 ubiquitin-protein ligase Hakai; Ecadherin binding protein E7; FLJ23109; HAKAI; HAKAI_HUMAN; MGC163403; OTTHUMP00000206720; OTTHUMP00000206722; OTTHUMP00000206724; RING finger protein 188; RNF188; MGC163401.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 55kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CBLL1/Ecadherin binding protein E7
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
Cullin 7蛋白(CUL7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠肺癌系威斯康星米勒菌腺苷酸环化酶激活肽-38抗体流式免疫组化
Cullin 2蛋白(CUL2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠逆转录病包装株大靑湖金黄杆菌L-谷氨酸二甲酯盐酸盐
Cullin 3蛋白(CUL3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠单核巨噬白血病塔宾曲霉L-苯甘氨酸甲酯盐酸盐
Cullin 4A蛋白(CUL4A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠骨髓瘤B淋巴葡萄暗拟棒束梗霉牛磺酸
Cullin 5蛋白(CUL5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)E.G7-OVA小鼠T淋巴瘤(鸡OVA基因修饰)中国汉纳酵母Na-苯甲酰-DL-精氨酸-对硝基酰盐酸盐
Cullin 4B蛋白(CUL4B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠T淋巴沙福芽孢杆菌亚氨基二乙酸
停靠蛋白2(DOK2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠小胶质瘤大豆慢生根瘤菌碱性磷酸酶
停靠蛋白3(DOK3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠肾小球系膜希瓦氏菌*β-葡聚糖酶
停靠蛋白4(DOK4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)猴肾白乳菇2′-脱氧肌苷-5′-三磷酸三钠盐
停靠蛋白5(DOK5)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠胰腺癌Termitomyces bulborhizus 2′-脱氧尿苷-5′-三磷酸四钠盐
停靠蛋白6(DOK6)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)猪鼻甲黏膜成纤维白假丝酵母氨基磺酸
停靠蛋白7(DOK7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)猪肾系米根霉邻苯二
二肽酶2(DPEP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)大鼠正常肝鸡、滑液支原体(-)阴性血清二苯磺酸钡
二肽酶3(DPEP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人恶性黑色素瘤耐冷冷杆菌六偏磷酸钠
肌肽酶2(CNDP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)人神经胶质瘤臭曲霉碱性氧化铝
上皮钙粘附分子结合蛋白E7说明书猪前列腺素D2合成酶(PGD2S)酶联免疫吸附测定试剂盒鼠胚成纤维Anti-IFN- Beta/FITC 荧光素标记抗人干扰素-β抗IgG
猪基质金属蛋白酶9(MMP-9)酶联免疫吸附测定试剂盒斑马鱼胚胎Anti-IFN- Gamma/FITC 荧光素标记干扰素-γ抗体IgG
猪抗钙调素特异抗体(CAM-Ab)酶联免疫吸附测定试剂盒 大黄鱼肾Anti-IFN- Gamma/FITC(Interferon Gamma) 荧光素标记抗大、小鼠IFN-γ抗IgG
猪间羟肾上腺素(MN)酶联免疫吸附测定试剂盒 鲤鱼上皮Anti-IFNGR2/FITC 荧光素标记干扰素-gamma受体2抗体IgG
猪轻肽铁蛋白(FTL)酶联免疫吸附测定试剂盒菜青虫卵巢Anti-IFN- Gamma/HRP 辣根过氧化物酶标记鼠抗人干扰素-γ/IFN-gamma单克隆抗体IgG
猪心肌钙黏蛋白(H-Cadherin)酶联免疫吸附测定试剂盒 蝙蝠肺Anti-IFNGR1/CD119/FITC 荧光素标记干扰素-gamma受体抗体IgG
猪抗氧化低密度脂蛋白抗体(OLAb)酶联免疫吸附测定试剂盒 牙鲆Anti-IGC/FITC 荧光素标记兔抗非洲爪蟾IGC抗体IgG
猪长效甲状腺激素(LATS)酶联免疫吸附测定试剂盒 EB病感染的人外周淋巴Anti-IGF-I/FITC 荧光素标记标记胰岛素样生长因子-I抗体IgG