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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-CADM2/IGSF4D/Cell adhesion molecule 2
中文名称 细胞粘附分子2科研抗体
别 名 CADM2; CADM2_HUMAN; Cell adhesion molecule 2; IgSF4D; Immunoglobulin superfamily member 4D; NECL 2; Necl 3; NECL-3; NECL2; Necl3; Nectin like protein 3; Nectin-like protein 3; synCAM 2; synCAM2.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学 神经生物学 细胞粘附分子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 45kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CADM2/IGSF4D/Cell adhesion molecule 2
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
信号素6A(SEMA6A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤株;C1/307杰丁毕赤酵母Smad 7抗体流式免疫组化
信号素6B(SEMA6B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤株;HYBASVIGL-1球孢白僵菌酪氨酸激酶B抗体流式免疫组化(神经生长因子受体的一种)IHC WB
信号素6C(SEMA6C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤株;WV-SPA-03污胶鼓菌D-亮氨酸
NSFL1辅因子(NSFL1C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤株;WV-TT-05白色沉积物杆菌多聚右旋赖氨酸
肽酶D(PEPD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤株;4-5根瘤菌DL-正缬氨酸
过氧蛋白同源物(PXDN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤株;6H7D11拜氏醋杆状菌崩溃酶
REST辅抑制因子1(RCOR1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠骨髓杂交瘤株;2F8贝伦格葡萄座腔菌梨生专化型盐酸环丙沙星
Rififylin蛋白(RFFL)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠骨髓杂交瘤株;3G12淡紫青霉无水甜菜碱
Synembryn蛋白(SYN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠骨髓杂交瘤株;8A3A10谷氨酸棒杆菌Ⅰ型胞苷
Synembryn B蛋白(SYNB)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤株;12H11假单胞菌属5-尿苷一磷酸二钠盐
Rab亲和蛋白3A(RPH3A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠潘氏杂交瘤株;GCLP茎点霉属天青I
R-脊椎蛋白2(RSPO2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤株;VZV-gE-4A2黄柄鸡油菌葡聚糖凝胶LH-60
Sacsin蛋白(SACS)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤株;PITPNM3 mAb枯草芽孢杆菌葡聚糖凝胶QAE-A25
丝氨酸组合因子1(SERINC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤株;4-1枯草芽孢杆菌1-氨基-8-萘酚-3,6-二磺酸钠
特异性蛋白1(Sp1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤株;4A7丁香直丝链霉菌2-羟基-1-萘甲酸
细胞粘附分子2科研抗体大鼠肌球蛋白(MYS)酶联免疫吸附测定试剂盒新生牛支持系;NBSAnti-CYP2E1/FITC 荧光素标记抗色素P450ⅡE1抗体IgG
大鼠N -乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAGase)酶联免疫吸附测定试剂盒牛trim5α基因沉默株;BTL2013Anti-CYP3A4/FITC 荧光素标记抗色素P450 3A4抗体IgG
大鼠N-乙酰半乳糖-6-硫酸酯酶(GAS)酶联免疫吸附测定试剂盒牛甲状腺系;hTERT-BTYAnti-CYP8A1/PTGIS/FITC 荧光素标记前列环素合成酶抗体IgG
大鼠新生甲状腺素(NN-T4)酶联免疫吸附测定试剂盒水牛皮肤成纤维样;WB-S5Anti-CYP19/FITC 荧光素标记色素P450 19抗体IgG
大鼠神经生长因子(NGF)酶联免疫吸附测定试剂盒水牛皮肤成纤维样;WB-S4Anti-CYP21/FITC 荧光素标记21-羟化酶抗体IgG
大鼠神经粘附分子(NCAM/CD56)酶联免疫吸附测定试剂盒水牛皮肤成纤维样;WB-S3Anti-Cyr61/FITC 荧光素标记富半胱氨酸肝素结合蛋白61IgG
大鼠脑红蛋白(NGB)酶联免疫吸附测定试剂盒水牛皮肤成纤维样;WB-S2Anti-Cytochrome C/FITC 荧光素标记色素 C抗体IgG
大鼠神经肽Y(NPY)酶联免疫吸附测定试剂盒水牛皮肤成纤维样;WB-S1Anti-Cytochrome P450 2C19/CYP2C19 /FITC 荧光素标记色素P450 2C19抗体IgG