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免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
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英文名称 Anti-C22orf31
中文名称 22号染色体开放阅读框31抗体规格
别 名 HS747E2A; bK747E2.1; C22orf31; Chromosome 22 open reading frame 31; HS747E2A; Hypothetical protein LOC25770; CV031_HUMAN.
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human
产品类型 一抗
研究领域 肿瘤 细胞生物 免疫学
蛋白分子量 predicted molecular weight: 33kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human C22orf31
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
实验步骤:
① 滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,10min后弃去,使标本保持一定湿度。
② 滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其*覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间(参考:30min)。
③ 取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸3-5 min,不时振荡。
④ 取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
⑤ 立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度,一般可用“+"表示:
(-)无荧光;(±)极弱的可疑荧光;(+)荧光较弱,但清楚可见;(++)荧光明亮;(+++ --++++)荧光闪亮。待检标本特异性荧光染色强度达“++"以上,而各种对照显示为(±)或(-),即可判定为阳性。
肌脂蛋白(SLN)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;HZAVYL异常汉逊酵母重组人甲状旁腺激素1-84
D-多巴色素变位酶(DDT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;16G12粟酒裂殖酵母花宝5号
归巢关联黏附分子(HCAM)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;2F2b深凹杯伞2-脱氧-D-核糖
钙网蛋白(CRT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;3H5槐生多年卧孔菌L-苹果酸
钙腔蛋白(CALU)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;4D11绿色木霉N-辛酰基-N-甲基葡糖
成纤维生长因子19(FGF19)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;7H11鸭疫里氏杆菌化[1-环己基-3-(3-氨丙基)碳二亚]
S100钙结合蛋白A8(S100A8)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;10F7皮壳青霉邻苯二甲酸
白介素17F(IL17F)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;8H5麦根腐平脐蠕孢氯化银
ⅩⅢ型胶原(COL13)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;HJY-2 ant_HLA-G大肠杆菌聚乙二醇35000
Ⅶ型胶原(COL7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;13D4多主葡萄壳菌癸二酸二甲酯
D-多巴色素变位酶(DDT)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;WNSs239F1A8耐寒短杆菌磷酸烯醇丙酮酸三环已盐
弹性蛋白酶3B(ELA3B)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;2A6大肠埃希氏菌亚硫酸铵
泛素关联蛋白2(UBAP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;GZHMD1F10中间普氏菌氧化铝H
尿溶蛋白3A(UPK3A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;8G9平田头菇3-1龙血素B
序列相似家族20成员A(FAM20A)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)小鼠杂交瘤;20A11镰雄腐霉大黄(唐古特大黄)
22号染色体开放阅读框31抗体规格大鼠组蛋白乙酰转移酶1(HAT 1)酶联免疫吸附测定试剂盒中国仓鼠卵巢(亚系克隆);CHO-5beta 41,2.5 CL5 Carrying P5b/dhfrAnti-C-Mer/MERTK /FITC 荧光素标记c-mer原癌基因酪氨酸激酶抗体IgG
大鼠组蛋白H2b(Histon-H2b)酶联免疫吸附测定试剂盒中国仓鼠卵巢系;CHO-TGF-beta-3/2000 Carrying Psv2-beta-TGFAnti-C-Met/HGFR /FITC 荧光素标记肝生长因子受体(原癌基因蛋白)抗体IgG
大鼠I型胶原(COL1)酶联免疫吸附测定试剂盒中国仓鼠卵巢(亚系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6Anti-C-Met/HGFR/HRP 辣根过氧化物酶标记肝生长因子受体(原癌基因蛋白)抗体IgG
大鼠透明质酸结合蛋白1(HABP1)酶联免疫吸附测定试剂盒中国仓鼠肺;CHLAnti-SMMHC/MYH11/FITC 荧光素标记平滑肌肌球蛋白重链抗体IgG
大鼠低氧诱导因子1α(HIF-1α)酶联免疫吸附测定试剂盒中国仓鼠肺;V79Anti-SM-MHC/FITC 荧光素标记心肌肌凝蛋白抗体IgG
大鼠艾杜糖硫酸酯酶(IDS)酶联免疫吸附测定试剂盒中国仓鼠卵巢;CHO-rFVIII-11Anti-CMKLR1/CHEMR23/FITC 荧光素标记趋化样因子受体1抗体IgG
大鼠3-羟基3-甲基戊二酰辅酶A还原酶(HMG-CoAR)酶联免疫吸附测定试剂盒中国仓鼠卵巢;CHO-K1/CAF13Anti-C-Myc/MYC/MTLC /FITC 荧光素标记C-Myc致癌基因抗体IgG
大鼠免疫球蛋白A(IgA)酶联免疫吸附测定试剂盒中国仓鼠卵巢;CHO-K1-S2-HSAAnti-c-Myc tag/FITC 荧光素标记c-Myc tag标签抗体IgG