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CK-13细胞角蛋白13ELISA试剂盒
参考价:

型号:48T/96T

更新时间:2022-05-30  |  阅读:501

详情介绍

产品属性:

产品名称

CK-13细胞角蛋白13ELISA试剂盒

英文名称

CK-13 ELISA Kit

产品规格

48T/96T

产品货号

LZ-E028992

需要而未提供的试剂和器材:

1. 产品仅用于科研标准规格酶标仪

2. 高速离心机

3. 电热恒温培养箱

4. 干净的试管和Eppendof管

5. 系列可调节移液器及吸头,一次检测样品较多时,用多通道移液器

6. 蒸馏水,容量瓶等。

标本要求:

1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。

2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

备试剂与收集血样:

1.  收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20   ℃或 -70   ℃ )保存,避免反复冻融。

2.  标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。

3.  10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。

4.  洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)


QQ截图20200429162339.jpg

检测程序:

1.  加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。

2.  洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。

3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。

4.  洗板:同前。

5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。

样本实验前准备:

ELISA试剂盒液体样本:包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1)血清

室温血液自然凝固10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

2)血浆:

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

3)尿液:

用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4)细胞培养上清:

检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。

5)培养细胞

检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融或加入组织蛋白萃取试剂,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

6)组织标本

切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),或组织蛋白萃取试剂, 用手工或匀浆器将标本匀浆化。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

靶向核糖核(TR)联免疫吸附测定试剂盒N-(2-羟乙)哌-N-2-羟磺二戊 99%盐标准溶液 0.2000mol/L(0.2N)

过氧化还原5(PRDX5)联免疫吸附测定试剂盒N-(2-羟乙)哌-N-2-羟磺N,N-二乙 99%盐标准溶液 0.1000mol/L(0.1N)

白介素1受体Ⅰ(IL1R1)联免疫吸附测定试剂盒N-(2-羟乙)哌-N-2-羟磺二异丁 99%盐溶液 6mol/L(6N)

XII B组磷脂A2(PLA2G12B)联免疫吸附测定试剂盒N-(2-羟乙)哌-N-2-羟磺钠盐二异丁 99.5%铁标准溶液 1000μ/ml

白介素2受体α(IL-2Rα/CD25)联免疫吸附测定试剂盒N-(2-羟乙)哌-N-2-羟磺钠盐二异 Standard for GC ≥99.5% (GC)铁标准溶液 100μ/ml

白介素2受体β(IL-2Rβ)联免疫吸附测定试剂盒N-(2-羟乙)哌-N-(2-乙磺)二异  >99.5%(GC)标准溶液 0.05000mol/L (0.1N)

白介素3介导核因子(NFIL3)联免疫吸附测定试剂盒N-(2-羟乙)哌-N-(2-乙磺)二异 CP,98%铅标准溶液 1000mg/L,溶剂:1%硝

白三烯C4(LTC4)联免疫吸附测定试剂盒N-(2-羟乙)哌-N-(2-乙磺)二异 分析标准品,>99.5% (GC)铅标准溶液 100μg/ml

白三烯D4(LTD4)联免疫吸附测定试剂盒N-(2-羟乙)哌-N-乙磺钠盐二异  >99.0%(GC)硝汞标准溶液 0.005000mol/L(0.01N)(剧品)

白三烯E4(LTE4)联免疫吸附测定试剂盒 N-(2-羟乙)哌-N-乙磺钠盐邻苯二二异丁酯 99%硝镍标准溶液 0.01000mol/L(0.01M)

白弹性蛋白(HLE)联免疫吸附测定试剂盒 N-(2-羟乙)哌-N-乙磺钠盐二乙 standard for GC, ≥99.5% (GC)镍标准溶液 1000μg/ml

白调节素(LR)联免疫吸附测定试剂盒 N-(2-羟乙)哌-N'-4-丁磺二乙 AR,99.0%镍标准溶液 100μg/ml

白共同抗原(LCA/CD45)联免疫吸附测定试剂盒N-(2-羟乙)哌-N'-4-丁磺二乙 CP,97.5%化溶液 3.3mol/L(3.3N)

白免疫球蛋白样受体亚家族B成员4(LILRB4)联免疫吸附测定试剂盒哌-N,N-双(2-乙磺)二乙 GC化溶液 3mol/L(3N)

白血病抑制因子受体(LIFR)联免疫吸附测定试剂盒哌-N,N-双(2-乙磺)二乙 GR,99.50%重铬标准溶液 1/24mol/L(0.25N)

甘氨酰tRNA合成(GARS)联免疫吸附测定试剂盒  哌-N,N-双(2-乙磺)二乙 ACS重铬标准溶液 1/60mol/L(0.1N)
CK-13细胞角蛋白13ELISA试剂盒用途:

细胞核染色,可用于免疫组化的复染

注意事项:

染色结果为:细胞核呈绿色。

储存条件:室温,避光,6个月

操作步骤:

1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。

2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。

3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。

4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用。

5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。

6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。

7.温育:操作同3。

8.洗涤:操作同5。

9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟。

10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。


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