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商品介绍:
kFlour555 Click-iT EdU 流式检测试剂盒,细胞增殖检测是评估细胞健康程度、遗传毒性及抗肿瘤药物效果的基础实验手段。精确的检测细胞增殖方法是BrdU法。EdU法检测试剂盒是brdu方法的革命性突破。EdU(5-溴-2-脱氧niao嘧啶)试剂盒是一种嘧啶类似物,可以在DNA合成期整合入DNA双链。EdU法检测是基于“点击"反应,一种由铜催化的叠氮化合物和炔烃的原子共价反应。本试剂盒中,EdU试剂含有炔烃,而kFlour555染料试剂含有叠氮化合物。点击法的EdU标记增殖快速有效,易于使用。只需少量的叠氮化染料即可非常有效地标记出整合的EdU。标准化的固定和去污剂促渗可以使检测试剂进入细胞,而brdu方法则需要DNA变性(如酸变性、热变性或者用Dnase消化)去暴露BrdU,从而方便BrdU抗体结合。 |
中文名称:kFluor555-EdU法细胞增殖检测试剂盒(流式)
英文名称:
产品规格:10T|20T|50T
产品货号:LZ-01X6430
发货周期:1~3天
公司产品现货供应,质量有保证、实验效果好,我司为您提供免费代测服务,同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将组织剪成1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
注意事项:
1、本试剂盒仅供科学研究使用,不可用于诊断或治疗。
2、螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心,将盖和管内壁上的液体离心至管底,避免开盖时试剂损失。
3、禁止与其他品牌的试剂混用,否则会影响使用效果。
4、样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。
5、最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿,可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗并*清除残留清洁剂。
6、避免皮肤或粘膜与试剂接触。
7、需长时间保存可-20℃避光保存。避免反复冻融,否则将会增加空白吸收,从而影响检测结果。最好小剂量分装,用避光袋或是黑纸、锡箔纸包住避光。
8、用培养基或 PBS 来配制待检测药物。如果待测药物有还原性,则测定不含细胞,仅含有 MTS 的待测药物溶液在 490 nm处的空白吸光度。如果该吸光度很小,则可以直接加入 MTS ,如果吸光度相对较大,则需要除去培养基,并用新鲜培养基洗涤细胞两次,然后加入新的 100 μl 培养基和 10 μl MTS 进行检测。
9、细胞处理需要小心操作,尽量避免人为的损伤细胞。
10、加 MTS 溶液后孵育时间的长短根据细胞的类型和细胞的密度等实验情况而定,对于大多数情况孵育 1 小时即可,白细胞需要培养较长时间。
11、如果不是使用 96 孔板检测,MTS 溶液的用量相应等比例增加即可。
培养操作步骤:
1.用盖片镊将盖玻片自75%乙醇中取出,用无菌丝绸布擦拭干净,不要用纱布;
2.将盖玻片轻轻放入6孔培养板(每孔一片)或培养皿中(每个平皿可放置2-3片);
3.在距离紫外灯直射范围内20-30 厘米处照射2-3小时;
4.将经过计数的细胞悬浮液移入培养板中,使盖玻片*浸在培养液中;
5.将培养板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,当贴壁细胞生长至覆盖培养板底部2/3面积时,将培养板取出,用盖片镊轻轻取出盖玻片,用蒸馏水漂洗后即可进行快速固定以及免疫细胞化学检测。
无孢蛋白(ASPN)英文名称:ASPN ELISA Kit色c氧化1抗体包装25ml
吻受体(KISS1R)英文名称:KISS1R ELISA Kit表面趋化因子受体4相关蛋白4抗体包装5ml
吻1(KISS1)英文名称:KISS1 ELISA Kit表面趋化因子受体4相关蛋白6抗体包装1g
胃泌抑制肽(GIP)英文名称:GIP ELISA Kit表面趋化因子受体4相关蛋白8抗体包装5g
胃泌(GT)英文名称:GT ELISA Kit硫软骨抗体包装100g
胃蛋白原C(PGC)英文名称:PGC ELISA Kit上皮类癌相关抗原抗体包装25g
胃蛋白原A(PGA)英文名称:PGA ELISA Kit磷化蛋白磷激PKC/CPI-17抗体包装5g
味觉受体1型成员2(TAS1R2)英文名称:TAS1R2 ELISA Kit着丝粒蛋白K包装100g
尾加压2受体(UTS2R)英文名称:UTS2R ELISA Kit肿瘤/抗原1B包装25g
维生D受体(VDR)英文名称:VDR ELISA Kit转铁蛋白受体抗体包装5g
维生D结合蛋白(DBP)英文名称:DBP ELISA Kit8号染色体开放阅读框K29抗体包装1g
维生B9(VB9)英文名称:VB9 ELISA Kit色P450 3A4抗体包装250mg
维X受体α(RXRα)英文名称:RXRα ELISA Kit色CYP2D1抗体包装5g
围脂滴蛋白4(PLIN4)英文名称:PLIN4 ELISA KitCD33抗体包装1g
微粒体S转移1(MGST1)英文名称:MGST1 ELISA Kit视网膜母瘤结合蛋白8抗体包装5g
彼尔姆短杆菌Brevibacterium│permense 质量规格:HPLC>98%,标准品组织蛋白G试剂盒风疹病IgG抗体参考品
银耳Tremella│fuciformis 质量规格:含量≥98.0%组织蛋白D试剂盒风疹病IgM抗体参考品
筑波链霉菌Streptomyces│tsukubaensis 质量规格:HPLC≥97.0%,标准品组织蛋白C试剂盒紫堇块茎碱;Corytuberine
kFluor555-EdU法细胞增殖检测试剂盒(流式)雷夫松氏 1,4-二溴-2,3-二氟苯维生B12Elisa
白酒 酒精度 3,4,5-三哒维生B2Elisa
桔绿木霉 2,6-吡啶二羧酸二乙酯维生B6Elisa
线虫被毛孢 1-甲基-3,5-二硝基-2-吡啶酮维生CElisa
枯草芽孢杆 4-苯乙维生DElisa
紫红曲霉 2,4-二溴-6-氟苯维生D2Elisa
酿酒酵母 2-苯乙盐酸盐维生D3Elisa
塔宾曲霉 4--3-乙基维生D受体Elisa
酿酒酵母 单水合物维生EElisa
pAAV-RC2 4--2-氟苯磺酰维生K1Elisa
蕈状芽孢杆 己二酸二乙酯维生K2Elisa
光黑腹 丁酸香茅酯尾加压Ⅱ相关肽Elisa
蜂房哈夫尼 酸香茅酯尾加压IIElisa
草木樨中华根瘤 橙花乙酸酯胃癌抗原MG7-AgElisa
鸡葡萄球 环己烯-1-酸频哪酯胃肠癌标志物CA199Elisa