公司产品仅供科研使用，下列是产品属性：

商品介绍：

本试剂盒含有两种不同的细胞凋亡诱导试剂，试剂A和试剂B。细胞凋亡诱导试剂A(Apopida)和试剂B(Apobid)分别可以诱导Hela、HEK293、CHO、COS等常见细胞的细胞凋亡。

由于细胞凋亡的诱导具有细胞特异性，细胞凋亡的机制也具有一定的细胞特异性，尽管细胞凋亡诱导试剂A和试剂B可以诱导常见的一些细胞的细胞凋亡，但是我们无法保证这两种试剂可以诱导任何一种细胞发生凋亡。细胞凋亡诱导试剂A和试剂B相互补充，可以诱导更多种类的细胞产生凋亡。本试剂盒至少可用于检测200个样品。

试剂盒组份：

细胞凋亡诱导试剂A——————200μl

细胞凋亡诱导试剂B——————200μl

注意事项：对于不同的细胞，需要摸索细胞凋亡诱导试剂的不同浓度和诱导时间。

储存条件：-20℃，有效期一年。
注意事项：

①加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

②使用干净的塑料容器配置洗涤液。

③按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。

④底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。

⑤洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

⑥使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。

⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。

⑧试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。

⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。

实验步骤：

(1)实验开始前将RNA提取液于65℃水浴锅中预热,离心管中加入ME(巯基乙醇),(10mL加80ul,50mL中加入300ul)

(2)取约0.8g菌丝体(液体培养获得的菌丝用真空抽滤即可！固体培养就更好说了),在液氮中迅速磨成精细粉末,装入50mL离心管,按1g材料8mL的量加入预热的RNA提取液,颠倒混匀

(3)65℃水浴3-10 min,期间混匀2-3次

(4)加入等体积的酚(注意是酸酚pH4.5)::异戊醇(25:24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(5)取上清,等体积的:异戊醇(24:1)抽提(10,000rpm,4℃,5 min)

(6)加入1/4V体积10M LiCl溶液,4℃放置6h以上(或过夜)

(7)10,000rpm,4℃离心20min

(8)弃上清,用500ul SSTE溶解沉淀

(9)酚::异戊醇(25:24:1)抽提两次,:异戊醇(24:1)抽提1次(10,000rpm,4℃,5min)

(10)加2V体积的无水乙醇,在-70℃冰箱沉淀30min以上

(11)12,000rpm,4℃离心20 min

(12)弃上清.沉淀用70%酒精漂洗一次,干燥

(13)加200ul的DEPC处理水溶解

(14)用非变性琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计扫描检测RNA的质量

(在抽提过程中,若蛋白质含量或其它的杂质还较多,可以增加抽提次数)

操作程序：

注意：最重要的是及时固定，并在固定液中加入0.1%的DEPC处理，以抑制RNA酶对mRNA的分解作用。此外，过度固定对原位杂交有明显的不利影响。

1．玻片的处理：一般采用多聚赖氨酸或APES。切片厚度10-20μm。

2．细胞在多聚赖氨酸处理的盖玻片上进行培养，条件为37℃和5%的CO2，所用培养基为Dulbecco基础培养基。细胞长好后0.1M PBS(PH7.4)洗2分钟×3次。

3．培养细胞和冰冻切片均可用下述方法固定：固定液为4%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 20--30分钟。蒸馏水充分洗涤，干燥后-20℃冰冻可保存2周以上。

4．30%H2O2 1份+纯甲醇50份混合，室温处理30分钟。蒸馏水洗涤3次。

5．暴露mRNA核酸片段：切片上滴加3%柠檬酸新鲜稀释1ml 3% 柠檬酸加2滴浓缩型，混匀)，37℃或室温消化5—120秒钟。有时也可以不消化。原位杂交用 PBS洗3次×5分钟。蒸馏水洗1次。

6.后固定：消化后才需要。固定液为1%多聚甲醛/0.1 M PBS(PH7.2-7.6)，含有1/1000 DEPC。室温固定 10分钟。蒸馏水洗涤3次。

7．预杂交：湿盒的准备——干的杂交盒底部加20%甘油20ml以保持湿度。按每张切片20μι加预杂交液。恒温箱38-42℃2—4小时。吸取多余液体，不洗。

8．杂交——按每张切片20μι杂交液，加在切片上。将原位杂交专用盖玻片的保护膜揭开后，盖在切片上。恒温箱38-42℃杂交过夜(根据杂交情况可以调节)。

9．杂交后洗涤：揭掉盖玻片，37℃左右水温的2×SSC洗涤5分钟×2次；37℃0.5×SSC洗涤15分钟×1次; 37℃0.2×SSC洗涤15分钟×1次(如果有非特异性染色，重复0.2×SSC洗涤15分钟×1-2次)。

10.滴加封闭液：37℃30分钟。甩去多余液体，不洗

11.滴加化鼠抗*：37℃ 60分钟或室温120分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。

12.滴加SABC：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×3次。勿用其它缓冲液和蒸馏水洗涤。

13.滴加化过氧化物酶：37℃20分钟或室温30分钟。原位杂交用PBS洗5分钟×4次。

14.DAB显色：使用DAB显色试剂盒—1ml蒸馏水加显色剂Ａ，Ｂ，C各一滴，混匀，加至标本上。一般显色20-30分钟。若无背景出现则可继续显色。也可自配DAB显色剂后显色。充分水洗。

15.必要时苏木素复染，充分水洗。

16.酒精脱水，二甲苯透明，封片。

肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)英文名称：TRAF6 ELISA Kit磷化Ack1抗体包装5g

肿瘤坏死因子受体超家族成员11A(TNFRSF11A/RANK)英文名称：TNFRSF11A/RANK ELISA Kit磷化腺苷单磷活化蛋白激α1抗体包装1g

肿瘤坏死因子配体相关分子1(TL1)英文名称：TL1 ELISA Kit磷化腺苷单磷活化蛋白激β1抗体包装5g

肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)英文名称：TNFsR-Ⅱ ELISA Kit磷化间变型淋巴瘤激抗体包装25g

肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)英文名称：TNFsR-Ⅰ ELISA Kit磷化毛细血管扩张性共济失调症突变蛋白抗体包装5g

肿瘤坏死因子β(TNF-β)英文名称：TNF-β ELISA Kit磷化三磷腺柠檬裂解抗体包装100ml

肿瘤坏死因子α(TNF-α)英文名称：TNF-α ELISA Kit磷化ATR抗体包装25ml

肿瘤坏死因子α(TNFα)英文名称：TNFα ELISA Kit核重定位及纺锤体检查点蛋白AMN1抗体包装500ml

肿瘤蛋白p53(TP53)英文名称：TP53 ELISA Kit天门冬酰连接糖基化11抗体包装1g

肿瘤标志物(CA724)英文名称：CA724 ELISA Kit衰老相关蛋白ASF1A抗体包装1ml

中性粒细胞明胶相关脂质运载蛋白(NGAL)英文名称：NGAL ELISA Kit基糖苷类磷结构域蛋白抗体包装100g

中性粒细胞弹性蛋白(NE)英文名称：NE ELISA Kit唾液糖蛋白受体1抗体包装25g

脂氧A4(LXA4)英文名称：LXA4 ELISA Kit芳香基硫酯F抗体包装5g

脂联(ADP)英文名称：ADP ELISA KitA激锚定蛋白5抗体包装1mg

脂联(Acrp30)英文名称：Acrp30 ELISA Kit小脑脊髓共济失调蛋白3抗体包装100g

γ2肌动蛋白抗体甘脱氢(GLDC)Infigratinib (BGJ-398; NVP-BGJ398) 是 FGFR 家族的有效抑制剂，抑制 FGFR1，FGFR2，FGFR3 和 FGFR4
细胞凋亡阳性对照试剂盒棕褐小单孢 2,5-二氨基-4,6-二羟基嘧啶盐酸盐1-磷酸鞘氨Elisa

猴头 L-(+)-环己基甘2,3-二磷酸甘油酸Elisa

Frigoribacterium 酸倍米松2,5寡腺苷酸合成Elisa

大肠杆 Fmoc-D-4-苯2,5寡腺苷酸合成2Elisa

枯草芽胞杆 （合成）20-HETEElisa

菊异茎点霉 盐酸二氟沙星25羟基维生DElisa

苍黄链霉 4-基α-L-吡喃阿伯糖苷25羟基维生D3Elisa

假单孢 4-羟基苯乙2-硫代噻唑烷-4-羧酸Elisa

大肠埃希氏 3,5-二氟溴苄3-硝基酪Elisa

三叶草根瘤 双酮-D-甘露糖3型1-磷酸鞘氨受体Elisa

委内瑞链霉 异龙脑4-羟基壬烯Elisa

红色红曲  叶绿5α还原Elisa

冬虫夏草 17α-乙炔基雌二5-甲基四氢Elisa

莫哈韦芽孢杆 针叶樱桃提取物5羟基乙酸Elisa

海洋杆 羟基酪5羟色Elisa