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百日咳杆菌(BP)核酸试剂盒价格
参考价:

型号:48T

更新时间:2021-03-13  |  阅读:715

详情介绍

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 百日咳杆菌(BP)核酸试剂盒价格

 规格

 48T

 货号

 LZP8097

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
千金子二萜二酰甲酰酯(标准品)(二巯基亚甲基)-2-甲基-6-(对二甲氨基基)-4H-吡喃

羌活(标准品)2-甲基

10-羟基癸酸(标准品)三(二亚苄基酮)二钯

羟基红花黄色素A(标准品)羟基-2-丁酮

马兜铃酸A去甲基代谢产物甲氧基盐酸盐

羟基积雪草苷(标准品)2-溴-6-吡啶

羟基积雪草酸(标准品)溴-2-氟甲

羟基积雪草酸5-溴-2-氟甲

海柯皂苷元3,二甲酸

灵芝酸 B2(1H)-PYRIDINONE,5-CHLORO-FLUORO-(9CI)

去甲劳丹盐酸盐,四氢盐酸盐西米替汀

异夏佛塔苷1-苄基-5-氧-吡咯烷羧酸甲酯

氨甲酰甲胆;贝胆2-氨基-6-羟基吡啶

5-羟甲基糠(标准品)2-苄

茄尼(标准品)甲基二酸

大波斯菊苷,芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(标准品)-甲酸

秦皮苷(标准品)DL-对氟氨酸

秦皮甲素(标准品)二-1,1-二甲基缩溶液

ADP核糖基化样因子8BCEA /FITC  荧光素标记癌胚抗原IgG100 ul

三酸腺苷酶家族蛋白2CEBP- Alpha /CLEBP Alpha /FITC  荧光素标记转录调节因子C/EBP α IgG100 ul

AKIRIN1蛋白Phospho-C/EBPbeta (Ser105) /FITC  荧光素标记兔抗、大、转录调节因子C/EBP βIgG100 ul

锚定蛋白样蛋白1Phospho-C/EBPalpha (Ser21) /FITC  荧光素标记兔抗、大、转录调节因子C/EBP α IgG100 ul

腺苷酸激酶2Phospho-C/EBPalpha (Thr222/226) /FITC  荧光素标记兔抗、大、转录调节因子C/EBP α IgG20 ul

顶体前体蛋白C/EBP Beta/FITC  荧光素标记转录调节因子C/EBP βIgG100 ul

黑色素瘤缺失样蛋白1Phospho-C/EBPbeta (Thr235) /FITC  荧光素标记兔抗、大、转录调节因子C/EBP βIgG100µl

未知糖基化转移酶AER61PBK/TOPK/FITC  荧光素标记PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶IgG100µl

铁蛋白Fe65Phospho-PBK/TOPK (Thr9) /FITC  荧光素标记酸化PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶IgG500µl
百日咳杆菌(BP)核酸试剂盒价格7号染色体开放阅读框46抗体Astragaloside IV中文名:黄芪甲苷别名:分子式:C41H68O14

NK细胞抑制性受体2DS4抗体Dipsacoside B中文名:川续断皂苷乙别名:分子式:C53H86O22

1号染色体开放阅读框147抗体Jujuboside A中文名:酸枣仁皂苷A别名:分子式:C58H94O26

5号染色体开放阅读框60抗体Pulchineside B4中文名:白头翁皂苷B4别名:Anemoside B4; Chinensioside A分子式:C59H96O26

CD44V5抗体Momordin Ic中文名:地肤子皂苷Ic别名:分子式:C41H64O13

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