组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

​

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
红景天苷Ribosomal Proin L26 (D8F6) Rabbit mAb酸二苄酯

荭草苷（标准品）EGF Receptor (E746-A750del Specific) (D6B6) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)5-噻吩-2-酸

XAV-939;NVP-XAV 939Rpb1 CTD Antibody Sampler Kit2,二磺酰

胡黄连苷I（标准品）C17orf59 (D2B5X) Rabbit mAb依泽替米贝

胡黄连苷 II(标准品)PI3 Kinase p110γ (D55D5) Rabbit mAb对基甲酰

胡黄连苷 III（标准品）PI3 Kinase p110γ (D55D5) Rabbit mAb1,丁磺酸内酯

胡萝卜苷(标准品)p300 (D2X6N) Rabbit mAb3,4,5-三氟

β-胡萝卜素（标准品）ZO-1 Antibody甲基酸酯

胡麻属苷（标准品）PhosphoPlus® RIP3 (Ser227) Antibody Duet四正丁基铵 二氟代三基硅酸盐

葫芦巴盐酸盐（标准品）Lamin A/C (4C11) Mouse mAb (Biotinylad)2-酸

葫芦素B(标准品)Acetyl-Histone H2B (Lys12) Antibody(溴基)酸

槲皮苷(标准品）PFKP Antibody2,7-二溴芴

槲皮素-7-O-葡萄糖苷(标准品)ALDH1A1 (D9Q8E) XP®Rabbit mAb(基)酸

花椒毒酚（标准品）Mouse Basic Fibroblast Growth Factor (mFGF basic/FGF2)硝酸钕六水合物

槐果（标准品）Mouse Basic Fibroblast Growth Factor (mFGF basic/FGF2)氨基-溴吡唑

环氧泽泻(标准品)Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control2,4,5-三氟甲

黄柏（标准品）FastScan™ Phospho-p70 S6 Kinase (Thr389) ELISA Kit2-氟-6-嘌呤

黄柏酮（标准品）DDB-2 (D4C4) Rabbit mAb二环己基化膦

酸化雄激素受体CD68/FITC  荧光素标记CD68IgG100 ul

酸化雄激素受体CD69/CLEC2C/AIM/FITC  荧光素标记活化诱导分子CD69IgG100 ul

酸化蛋白激酶AKT1,2,3CD73/FITC  荧光素标记胞浆-5´-核苷酸酶-ⅡIgG100 ul

酸化蛋白激酶BCD79A/IGBP-1 /FITC  荧光素标记免疫球蛋白结合蛋白-1IgG100 ul

酸化活化复制因子2B7-1/CD80 /FITC  荧光素标记抗刺激分子B7-1蛋白IgG100 ul

凋亡相关蛋白3CD80/B7-1/FITC  荧光素标记刺激分子B7-1蛋白IgG100 ul

自噬相关蛋白18CD82/KAI1/FITC  荧光素标记肿瘤转移抑制蛋白1IgG20 ul

自噬相关蛋白4ACD83/Cell surface proin HB15/FITC  荧光素标记CD83IgG100 ul

载脂蛋白A4CD84/SLAMF5/FITC  荧光素标记CD84IgG100 ul
A族链球菌(GAS)核酸试剂盒厂家活性依赖的神经保护肽抗体2,4,6,6-Tetramethyl-3(6H)-pyridine中文名：别名：分子式：C9H13

α1酸性糖蛋白1/类粘蛋白1抗体Crebanine中文名：克班宁别名：8,9-Dimethoxy-1,2-methylenedioxyaporphine分子式：C20H214

α1酸性糖蛋白2抗体（类粘蛋白2）Glycozolinine中文名：别名：6-Methyl-9H-carbazol-3-ol; Glycozolil分子式：C13H11

核突触蛋白抗体Siacutine中文名：青风藤碱别名：分子式：C19H214

β-肌动蛋白/β-Actin 抗体（内参抗体）Pterolactam中文名：别名：5-Methoxy-2-pyrrolidine分子式：C5H92