组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

​

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
Fmoc-D-甲氧基氨酸Cyclophilin A (D2Y4M) Rabbit mAb甲氧基酸

奎宁环酮盐酸盐Loading Control Antibody Sampler KitN-基

氟咪唑MYPT1 Antibody Sampler Kit异酸酯

氟咪唑(标准品)HGK (D19H10) Rabbit mAb2-羟基吡啶

伊索拉定SRF (D71A9) XP® Rabbit mAb氨基吡咯烷

ADA单钠盐SRF (D71A9) XP® Rabbit mAb基硫脲

N-（酰氨基）亚氨基二酸二钠盐SimpleChIP® Human TAP1 Promor Primers三对甲基膦

ADA；N-(2-酰基)-2-亚氨基二酸DUSP4/MKP2 (D9A5) Rabbit mAb1--(三氟甲氧基)

ACES；N-(酰氨基)-2-氨基烷磺酸Anti-rabbit IgG (H+L) (DyLight™ 800 4X PEG Conjuga)对酸

(2S)-2-N-芴甲氧羰基氨基-2-甲基-6-庚酸Anti-rabbit IgG (H+L) (DyLight™ 800 4X PEG Conjuga)2-溴-5-

泼尼松龙酸钠Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb氨基

4,4'-双甲氧基*基Androgen Receptor (D6F11) XP® Rabbit mAb溴-2,6-二氟酚

N-甲酰-N-基羟;钽试剂;BPHAHuman Lant Transforming Growth Factor β1 (hLant TGF-β1)1-溴-2-甲基丁烷

二叔丁基硅基双（三氟磺酸）Human Lant Transforming Growth Factor β1 (hLant TGF-β1)基琥珀酸

2-基N,N,N',N'-四异基亚酰二(试剂)CD11c (3.9) Mouse mAb (APC-Cy7® Conjuga)十二烷基

酸酮酸酯一SimpleChIP® Human SUB1 Promor Primers甲基吡啶

6-鸟嘌呤核苷CLOCK (D45B10) Rabbit mAb肉桂

肌苷-5'-三酸三钠盐KLF5 (D7S3F) Rabbit mAbN-苄基

血管紧张素1转换酶抑制剂Phospho- Beta-Canin (Ser552) /FITC  荧光素标记兔抗、大、β 连环素蛋白IgG100 ul

拮抗凋亡转录因子Phospho- Beta-Canin (Ser675) /FITC  荧光素标记兔抗、大、β 连环素蛋白IgG100 ul

α-1抗胰糜蛋白酶Phospho- Beta-Canin (Thr41/Ser45) /FITC  荧光素标记兔抗、大、β 连环素蛋白IgG20 ul

α-1抗胰蛋白酶 Gamma-Canin/ Gamma-cats /FITC  荧光素标记γ-连环蛋白（γ-γ链接素）IgG100 ul

ATP结合蛋白家族6cath-B/CB/FITC  荧光素标记组织蛋白酶BIgG20 ul

三酸腺苷结合盒亚家族G1cath-D/CD /FITC  荧光素标记组织蛋白酶DIgG100 ul

脂联素受体2cath-G/CG /FITC  荧光素标记组织蛋白酶GIgG100 ul

ANGEL1蛋白cath-H/CH /FITC  荧光素标记组织蛋白酶HIgG20 ul

ANGEL2蛋白cath-K/CK /FITC  荧光素标记组织蛋白酶KIgG100 ul
河弧菌(VF)核酸试剂盒规格人细胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA 英文名称：Human Cyclin-D2 ELISA Kit进口/原装

人细胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA试剂盒英文名称：Human Cyclin-D3 ELISA Kit进口/分装

人细菌(BV)ELISA试剂盒 英文名称：Human bacterial vagisis,BV ELISA Kit进口/分装

人纤连蛋白(FN)ELISA试剂盒英文名称：Human Fibronectin，FN ELISA Kit 进口/原装

人纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA试剂盒 英文名称：Human plasmin/fibrilysin,PL/Fbn ELISA Kit*

人纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒英文名称：Human plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit进口/原装小鼠促性腺素释放素受体（GHR）ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠促性腺激素释放激素(GH)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠促生长激素释放激素(GHRH)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠促上腺皮质激素(ACTH)ELISA试剂盒      组装/原装