注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
右旋延胡索素(标准品）HSP70 Antibody三溴化

对溴苄 HSP70 (6B3) Rat mAb氟化钙

灵芝酸BHSP90 Antibody高酸钠

延胡索素；消旋延胡索素(标准品)HSP90 (E289) Antibody

延胡索素；消旋延胡索素HSP70 (D69) Antibody高酸锂

孕酮醋酸酯,孕诺龙酸酯HSP90 (C45G5) Rabbit mAb1,并二氧-甲

孕酮醋酸酯(标准品)HSP90 (C45G5) Rabbit mAb四基氢氧化铵

壳聚糖(M.W70w-100w)SimpleChIP® Human C/EBPδ Promor Primers水合肼

壳聚糖(M.W.10万)Mouse (MOPC-21) mAb IgG1 Isotype Control (Alexa Fluor® 488 Conjuga)基三氧基硅烷

大蒜素，二基二硫Cas9 (7A9-3A3) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)原碳酸四酯

α-香附酮Mitochondrial Dynamics Antibody Sampler Kit硅酸四酯

头孢克洛(标准品)Rab6 Antibody氨曲南

头孢克洛PathScan® Phospho-YAP (Ser127) Sandwich ELISA Kit(3S)-3,吗啉二羧酸 叔丁酯

头孢拉定Phospho-DBC1 (Thr454) Antibody酸三酯

头孢拉定(标准品)p53 (DO-7) Mouse mAbCBZ-ALPHA-ALLYL-L-GLY

倍他米松17-戊酸酯,戊酸倍他米松NF-κB2 p100/p52 Antibody2,5-二吡啶-

戊酸倍他米松(标准品)NF-κB2 p100/p52 Antibody二氧基二甲基硅烷

头孢唑肟,头孢唑肟酸TAZ (V386) Antibody盐酸特比萘芬

生物素检测试剂盒p-BAD/FITC  荧光素标记抗酸化相关死亡促进因子p-BADIgG20 ul

三聚ELISA快速检测试剂盒BAD(phospho Ser75,Ser99,Ser118) /FITC  荧光素标记酸化相关死亡促进因子IgG100 ul

鸟类催素(PRL/LTH)ELISA试剂盒Phospho-Bad(Ser136) /FITC  荧光素标记兔抗、大、相关死亡促进因子IgG100 ul

鸟H5N1 IgGELSIA 试剂盒Phospho-Bad(Ser155) /FITC  荧光素标记兔抗、大、相关死亡促进因子IgG100 ul

猕猴骨特异性性酸酶B(ALP-B)ELISA试剂盒BADH2/FITC  荧光素标记BADH2IgG20 ul

家蚕卵黄蛋白(LT)ELISA试剂盒BAFF/CD257/FITC  荧光素标记TNF家族B细胞激活因子IgG100 ul

鲫鱼卵黄蛋白原(VTG)ELISA试剂盒BAFFR/Tnfrsf13c/CD268/FITC  荧光素标记B细胞活化因子受体IgG100 ul

核黄素转运因子3(RFT3)ELISA试剂盒Bak/FITC  荧光素标记Bcl-2同源拮抗剂BakIgG100 ul

核黄素转运因子2(RFT2)ELISA试剂盒 Phospho-BAP1 (p-Ser592)(human) /FITC  荧光素标记兔抗酸化癌易感基因1()IgG100 ul
斑节对虾杆状病毒(MBV)核酸试剂盒价格胞外分泌型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶FAM20C抗体tert-Butyl rosuvastatin中文名：别名：分子式：C26H36FN3O6S

四连接同源蛋白FJX1抗体3-O-Benzyl estrone中文名：3-O-苄基雌酚酮别名：分子式：C25H28O2

原癌基因FRAT1抗体19-rtestosterone acetate中文名：19-去甲睾酮乙酸盐别名：分子式：C20H28O3

胆汁酸受体抗体Androstalone acetate中文名：雄诺龙醋酸酯别名：分子式：C21H32O3

FXYD离子转运调节因子6抗体Androstenediol-3-acetate中文名：雄甾烯二醇-3-乙酸酯别名：分子式：C21H32O3
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。