注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
刺槐素Fas (C18C12) Rabbit mAb对氧基甲酸

盐酸安非他酮Receptor Tyrosine Kinase Antibody Sampler Kit基酚

左旋氨地平/磺酸左旋氨地平nNOS Antibody

左旋氨地平/磺酸左旋氨地平（标准品）NG2 Antibody三氟磺酸锡

曲尼司特nNOS (C12H1) Rabbit mAbDL-对甘氨酸

曲尼司特(标准品)Bcl10 (C78F1) Rabbit mAb1,3,5-*氧基

头孢羟氨苄 （标准品）STAG2 Antibody异酸间甲酯

头孢羟氨苄 CD27 (O323) Mouse mAb (APC Conjuga)羟基

D-泛酸钠Tom20 (D8T4N) Rabbit mAb羟基-甲氧基甲

依度沙班;伊多塞班TFEB Antibody缩二

牛防风素;6-甲氧基当归素CHD3 Antibody肉桂酰

6-羟基(标准品)CHD3 Antibody肉桂酸

6-羟基Helios (D8W4X) XP® Rabbit mAb哌啶

甘氨石胆酸(GLCA)Helios (D8W4X) XP® Rabbit mAbN(α)-Z-D-2,二氨基酸

N-异基酰(含稳定剂MEHQ)BCL6 Antibody三间基基膦

匹卡米隆Acetyl-Histone H3 (Lys56) Antibody1-(*基硅基)炔

双酸钠Acetyl-Histone H3 (Lys56) Antibody5-甲基异恶唑-甲

L-甘-谷二肽,甘氨酰-L-谷氨酰一水合物CHD4 Antibody氨基-氟酚

17-酮类固(17-KS)ELISA试剂盒phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1175)  酸化血管内皮生长因子受体2100 ul

17-羟孕酮ELISA试剂盒phospho-VEGF receptor 2 (Tyr1212)  酸化血管内皮生长因子受体2100 ul

17羟孕酮(17-OHP)ELISA试剂盒phospho-VEGF receptor 2 (Tyr996)  酸化血管内皮生长因子受体220 ul

17羟皮质类固(17-OHCS)ELISA试剂盒sVEGFR2  可溶性血管内皮生长因子受体21 Kit

17-α甲睾酮(17-αMT)ELISA试剂盒VEGFR3  血管内皮细胞生长因子受体-3100 ul

15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒VEGFR-3  血管内皮细胞生长因子受体-3100 ul

12羟二十烷四酸(12-HE)ELISA试剂盒Versican  蛋白聚糖Versican100 ul

11β羟类固脱氢酶1型(11β-HSD1)ELISA试剂盒Vimentin  波形蛋白100 ul

1,4,5-三酸肌(IP3)ELISA试剂盒Phospho-Vimentin (Ser56)  酸化波形蛋白100 ul
戊型肝炎病毒(HEV)核酸试剂盒规格酶动力蛋白1抗体Soyasapogel B中文名：大豆皂醇B别名：12-Oleanene-3β,22β,24-triol分子式：C30H50O3

脑啡肽A抗体Cabraleahydroxylactone acetate中文名：别名：分子式：C29H46O4

强直性肌营养不良相关蛋白9抗体Obacune中文名：黄柏酮别名：分子式：C26H30O7

DYX1C1蛋白抗体1-O-Deacetyl-2α-hydroxykhayalide E中文名：别名：分子式：C27H32O11

E3泛素蛋白连接酶dzip3抗体Ziyuglycoside I中文名：别名：分子式：C41H66O13
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。