注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
二甲偶氮紫Ic-Kit (Ab81) Mouse mAb-2-羟基甲

二甲基偶氮磺IIIc-Kit (Ab81) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)5-氨基烟酸

H-间二酚(>97.0%(HPLC))Phospho-Cofilin (Ser3) Antibody5-氨基-2-吡啶羧酸

偶氮磺III(>90.0%(HPLC))Phospho-Cofilin (Ser3) Antibody2-己基-1-癸

2-(磺基偶氮）-1,8-二羟基萘-3,6-二磺酸三钠盐水合物(>95.0%(HPLC))Phospho-Cofilin (Ser3) (77G2) Rabbit mAb氟-甲氧基

2-(5-溴-2-吡啶偶氮)-5-二甲氨基酚(>93.0%(HPLC))Phospho-Cofilin (Ser3) (77G2) Rabbit mAb5-苄氧基吲哚-

(3,5-二溴-2-吡啶偶氮)-1,二(>98.0%(T))Phospho-Cofilin (Ser3) (77G2) Rabbit mAb蒎

5-二基-2-(2-吡啶偶氮)酚(>98.0%(HPLC))JMJD1B (C69G2) Rabbit mAb基甲酸

2,2'-二羟基偶氮(>98.0%(T))Phospho-MAPKAPK-2 (Thr222) (9A7) Rabbit mAbL(-)岩藻糖

芪偶氮Phospho-MAPKAPK-2 (Thr222) (9A7) Rabbit mAb(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂烷-2-基)

荧光镓试剂(>98.0%(T))ZIP7/SLC39A7 (D1O3A) Rabbit mAb盐酸强力霉素

浴酮灵二磺酸二钠盐Cofilin (D59) Antibody溴甲酸酯

水合红菲绕啉二磺酸钠水合物MARK1 Antibody2-甲基-6-基

浴铜灵 (升华提纯)(>99.0%(HPLC)(T))Phospho-Ras-GRF1 (Ser916) Antibody富马酸单酯

红菲绕啉(升华提纯)(>99.0%(HPLC)(T))Ras-GRF1 AntibodyGRUBB‘S第二代催化剂

浴铜灵(>98.0%(T))Axin1 (C7B12) Rabbit mAb甘氨酸苄酯盐酸盐

新亚铜试剂半水合物(>98.0%(T))Phospho-Dab1 (Tyr232) Antibody6-硝基-1-茚满酮

红菲咯啉(>99.0%(T))Phospho-Dab1 (Tyr220) Antibody甲基-1-茚酮

巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒PHD2  脯氨酸羟化酶2100 ul

巨噬细胞炎症蛋白5(MIP-5)ELISA试剂盒PS-1 (NT)  早老素蛋白-120 ul

巨噬细胞炎症蛋白1β(MIP-1β/CCL4)ELISA试剂盒PS-1(CT)  早老素蛋白-1100 ul

巨噬细胞炎症蛋白1α(MIP-1α/CCL3)ELISA试剂盒PS-1  早老素蛋白-1300 ul

巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA试剂盒PSA  前列腺特异性抗原(包被)100 ul

巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP-3α/CCL20)ELISA试剂盒PSA  鼠抗前列腺特异性抗原(检测)20 ul

巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA试剂盒CPSA(mouse monoclonal)  复合前列腺特异性抗原100µl

巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)ELISA试剂盒PMSA/FOLH1  前列腺特异膜抗原100 ul

巨噬细胞来源的趋化因子(MDC/CCL22)ELISA试剂盒PSAP/PAP  前列腺酸性酸酶100 ul
中华鲟特定基因序列PCR检测试剂盒规格去整合素样金属蛋白酶8抗体Haginin A中文名：别名：分子式：C17H16O5

芳香乙酰胺脱乙酰基酶样蛋白3抗体Isoficusin A中文名：别名：分子式：C25H24O5

磷酸化APP(Tyr757)淀粉样肽前体蛋白抗体Narirutin中文名：芸香柚皮苷别名：柚皮芸香苷; Isonaringin分子式：C27H32O14

磷酸化肌动蛋白结合蛋白Girdin抗体Fura(2",3":7,6)-4'-hydroxyflavane中文名：呋喃(2",3":7,6)-4'-羟基二氢黄酮别名：分子式：C17H12O4

2-氨基乙硫醇双加氧酶抗体Iridin中文名：野鸢尾苷别名：分子式：C24H26O13
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。