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玉米内源基因PCR检测试剂盒价格
参考价:

型号:50T

更新时间:2021-03-13  |  阅读:735

详情介绍


注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 玉米内源基因PCR检测试剂盒价格

 规格

 50T

 货号

 LZP7881

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
(R)-(-)-N-(3,5-二甲酰)-α-甘氨酸(>98.0%(HPLC)(T))Cathepsin B (D1C7Y) XP® Rabbit mAb甲基三氧基硅烷

(1S,2S)-(-)-1,2-二基二(>98.0%(GC)(T))Cathepsin B (D1C7Y) XP® Rabbit mAb溴-3,5-二氟

(1R,2R)-(+)-1,2-二基二(>97.0%(GC)(T))Phospho-Progesrone Receptor (Ser190) Antibody3,二甲氧基酚

(1R,2R)-(-)-N,N'-二甲基环己烷-1,2-二(>94.0%(GC))Progesrone Receptor (6A1) Mouse mAb2-氨基-5-溴噻唑

(1S,2S)-(+)-N,N'-二甲基环己烷-1,2-二(>98.0%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr771) (76D6) Rabbit mAb硫酚

(R)-(+)-α异酸酯(>98.0%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr771) (76D6) Rabbit mAb溴

异酸(S)-(-)-α(>95.0%(GC))PDGF Receptor α (D1E1E) XP® Rabbit mAb2--6-氟酚

异酸(R)-(-)-1-(萘基)酯(>90.0%(GC))PDGF Receptor α (D1E1E) XP® Rabbit mAb氟-三氟甲

异酸(S)-(+)-1-(1-萘基)酯(>95.0%(GC))PDGF Receptor β (2B3) Mouse mAb环己烷

(S)-(+)-α-甲氧基(>98.0%(GC)(T))CD3 (UCHT1) Mouse mAb (PerCP-Cy5.5® Conjuga)2,6-二苄基溴

(R)-(-)-α-甲氧基(>98.0%(GC)(T))Progesrone Receptor A/B Antibody酰基酸

(R)-(+)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)(>98.0%(GC)(T))Di-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C64G9) Rabbit mAb (PE Conjuga)邻二

(S)-(-)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)(>98.0%(GC)(T))BiP (C50B12) Rabbit mAb1-癸烷

(+)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)酰(>98.0%(GC))BiP (C50B12) Rabbit mAb氨基-吡啶

(-)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)酰(>98.0%(GC))Progesrone Receptor B Antibody酸酐

(+)-α-甲氧基-α-(三氟甲基)酐(>95.0%(T))Phospho-PERK (Thr980) (16F8) Rabbit mAb3,二

(R)-(-)-2-甲氧基-2-(1-萘基)酸(>99.0%(HPLC))Phospho-PERK (Thr980) (16F8) Rabbit mAb2-溴-基吡啶

(S)-(+)-2-甲氧基-2-(1-萘基)酸(>99.0%(HPLC))Fatty Acid Synthase (C20G5) Rabbit mAbD-天冬酰一水物

鸡白介素2(IL-2)ELISA试剂盒Phospho-PLC beta3 (Ser1105)  酸化酯酶Cβ3100 ul

鸡白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒PKC beta 1/2  蛋白激酶C beta 1/2100 ul

鸡白介素18(IL-18)ELISA试剂盒phospho-PKC (Thr500)  酸化蛋白激酶C(T500)100 ul

鸡白介素17(IL-17)ELISA试剂盒phospho-PKC beta 1/2(Thr500)  酸化蛋白激酶C β1/β2(Thr500)20 ul

鸡白介素15(IL-15)ELISA试剂盒Phospho-PKC alpha/beta II (Thr638/641)  酸化蛋白激酶C α/β2100 ul

鸡白介素12(IL-12/70)ELISA试剂盒PKC alpha  蛋白激酶C α20 ul

鸡白介素10(IL-10)ELISA试剂盒PLCG 2/PLC gamma 2  酯酶Cγ2100 ul

鸡白介素1(IL-1)ELISA试剂盒Phospho-PLC gamma 2 (Tyr1217)  酸化酯酶Cγ2100µl

γ干扰素(IFN-γ)ELISA试剂盒Phospho-PLC gamma 2 (Tyr759)  酸化酯酶Cγ2100 ul
玉米内源基因PCR检测试剂盒价格酰基辅酶A脱氢酶短链抗体Nicotine中文名:尼古丁别名:烟碱分子式:C10H14N2

过氧化物酶酰基辅酶A氧化酶1抗体1,3,9-Trimethyluric acid中文名:1,3,9-*基尿酸别名:分子式:C8H10N4O3

磷酸化细胞凋亡信号调节激酶1抗体Gliotoxin中文名:胶霉毒素别名:胶霉素分子式:C13H14N2O4S2

转化生长因子β诱导蛋白3抗体(半胱氨酸和丝氨酸富含核蛋白1)Cephalotaxine中文名:三尖杉碱别名:分子式:C18H214

磷酸化间变型淋巴瘤激酶抗体Pachysamine M中文名:别名:分子式:C28H44N2O2

 

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