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腺病毒PCR检测试剂盒说明书
参考价:

型号:50T

更新时间:2021-03-13  |  阅读:622

详情介绍

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 腺病毒PCR检测试剂盒说明书

 规格

 50T

 货号

 LZP7835

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
分子筛3A(干燥剂用)Phospho-p53 (Ser315) Antibody硫酸奎宁二水合物

分子筛3A(pellets,5 mm)Phospho-p53 (Ser315) Antibody1,二酰基

分子筛3A(pellets,2-3 mm)Wnt5a/b (C27E8) Rabbit mAb1,2-二溴

4A分子筛(20-40目,气相、液相色谱柱)Wnt5a/b (C27E8) Rabbit mAb环甲酰

4A分子筛(60-80目,气相、液相色谱柱)Phospho-AMPKα (Thr172) Antibody2--5-(甲氧基)嘧啶

4A分子筛(80-100目,气相、液相色谱柱)Phospho-AMPKα (Thr172) Antibody基酸

分子筛4A(2mm-3mm,干燥剂用 )AMPK-alpha Antibody2-二吡啶基酮

分子筛4A(beads,8 mesh )AMPK-alpha Antibody四基溴化膦

分子筛4A( beads,8-12 mesh)p53 (1C12) Mouse mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-氟-5-硝基吡啶

分子筛, 5 Å(20-40目,气相、液相色谱柱)GLI1 (V812) Antibody酸锂

分子筛, 5 Å(40-60目,气相、液相色谱柱)GLI1 (V812) Antibody2,6-二甲氧基萘

分子筛, 5 Å(60-80目,气相、液相色谱柱)EGR1 (44D5) Rabbit mAb (PE Conjuga)2,6-二羟基萘

分子筛, 5 Å(80-100目,气相、液相色谱柱)Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb甲氧基环戊烷

分子筛, 5 Å(干燥剂用)Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb四[3,5-双(三氟甲基)基]酸钠水合物

分子筛, 5 Å(pellets,5 mm)Phospho-AMPKα (Thr172) (40H9) Rabbit mAb6-基吡啶-2-羧酸

分子筛, 5 Å(pellets, 2.5-3.5 mm)SLP-76 (E4N7E) Rabbit mAb2-溴-三氟甲氧基

高岭土(CP)β-Canin (D10A8) XP® Rabbit mAb (HRP Conjuga)2-溴-5-甲

超细高岭土(325(44um))AMPKγ2 Antibody(S)-(-)-N-苄基-1-

CD45分子(CD45)ELISA试剂盒Mre11/HNGS1  DNA损伤关键蛋白Mre11100 ul

CD44分子(CD44)ELISA试剂盒Phospho-Mre11 (Ser676)  酸化DNA损伤关键蛋白Mre11300 ul

CD44变体6(CD44-v6)ELISA试剂盒MPO  髓过氧化物酶100 ul

CD3分子(CD3)ELISA试剂盒MR(Mineralocorticoid receptor)  盐皮质激素受体100 ul

CD34分子(CD34)ELISA试剂盒MRP1  多药耐药相关蛋白120 ul

CD30分子(CD30)ELISA试剂盒MRP2  多药耐药相关蛋白2100 ul

CD22分子(CD22)ELISA试剂盒MRP3  多药耐药相关蛋白3100 ul

CD209分子(CD209)ELISA试剂盒MRP4/ABCC4  多药耐药相关蛋白420 ul

CD19分子(CD19)ELISA试剂盒MRP5/ABCC5  多药耐药相关蛋白5100 ul
腺病毒PCR检测试剂盒说明书B7-H4抗体Taxifolin 3-O-xyloside中文名:别名:分子式:C20H20O11

β分泌酶抗体3-Hydroxy-5,7-dimethoxy-3',4'-methylenedioxyflavan中文名:别名:分子式:C18H18O6

相关死亡促进因子Bad抗体Taiwanhomoflavone B中文名:别名:分子式:C32H24O10

BaxDihydroobovatin中文名:别名:分子式:C20H20O4

牛血清白蛋白抗体Epicatechin pentaacetate中文名:别名:分子式:C25H24O11

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