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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
2-己酮(standard for GC,>99.5%(GC))ATGL (30A4) Rabbit mAbalpha,alpha-二酸

正庚(standard for GC,≥98%(GC))Mig6 Antibody1,2-二溴四氟

七氟丁酸(98%)Phospho-eIF4G (Ser1108) Antibody2,6-二溴-

2,5-己二酮(standard for GC,≥99%(GC))Phospho-eIF4G (Ser1108) Antibody二酸单甲酯单盐

2,5-己二酮(分析标准品,≥99.5%(GC))HSP27 Antibody (Rodent Preferred)(R)-1-BOC-羟甲基哌

己烷(分析标准品，≥99.8% (GC))PPARγ (81B8) Rabbit mAb5-羟基烟酸

六氟异(HFIP)(用于GC衍生化, ≥99.8% (GC))eIF4H Antibody1,2,4,5-环己烷四甲酸二酐

甲酸(标准品)VEGF-C Antibody酰氨基环己酮

糠(standard for GC, ≥99.5% (GC))PDI Antibody咪唑并[1,2-a]嘧啶

邻二甲酸二正戊酯(CP,97%)AS160 Antibody-甲酸

3',3'',5',5''-四溴酚酞酯(80%,用于显微镜)Glu-Glu Tag Antibody-2,8-双(三氟甲基)喹啉

三(无水级,≥99％,含100-200ppm戊稳定剂)PRMT1 (A33) Antibody咪唑并[1,2-a]吡啶

异(无水级, 99.5%)APP/β-Amyloid (NAB228) Mouse mAb氟邻二甲酸

四(无水级,≥99.9%, 无稳定剂)APP/β-Amyloid (NAB228) Mouse mAb2,二氟甲酸

四(ACS,>99.5%(GC))APP Antibody溴-1-甲基-1H-吡唑

正庚烷(AR,98%)PRMT1 (F339) Antibody2,4,5-三氟溴苄

正庚烷(分析标准品,≥99.8%(GC))Neuronal Marker IF Antibody Sampler Kit II1-叔丁氧羰基-哌啶酸

正庚烷(>99%(GC))PathScan® Total Btk Sandwich ELISA Kit溴邻二

GDP解离抑制因子2(GdI2)ELISA试剂盒MDM2  双微体2癌基因100 ul

GAD/IA2自身ELISA试剂盒Phospho-MDM2 (Ser166)  酸化双微体2癌基因100 ul

G1/S特异性细胞周期蛋白E1(CCNE1)ELISA试剂盒MDR1/p-GP/CD243  多药耐药蛋白/P-糖蛋白100 ul

F-肌动蛋白(F-actin)ELISA试剂盒MEF2A  肌细胞增强因子2100 ul

FOS 样抗原2(FOSL2)ELISA试剂盒Phospho-MEF2A (Thr312)  酸化肌细胞增强因子2500 ul

FMS样酪氨酸激酶3配体(Flt-3L)ELISA试剂盒Phospho-MEF2A (Ser408)  酸化肌细胞增强因子2300 ul

FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)ELISA试剂盒Megsin  丝氨酸蛋白酶抑制剂B7100 ul

Fc受体样蛋白3(FCRL3)ELISA试剂盒Melamine  三聚20 ul

FAM172A蛋白(FAM172A)ELISA试剂盒Melamine  三聚300 ul
微生物致病菌PCR快速系列规格腺苷三磷酸结合盒转运体9抗体Alstonine中文名：别名：分子式：C21H20N2O3

三磷酸腺苷结合盒转运蛋白4抗体6-Acetonyl-N-methyl-dihydrodecarine中文名：别名：分子式：C23H215

肌动蛋白结合蛋白LIM3抗体3-Furfuryl 2-pyrrolecarboxylate中文名：别名：分子式：C10H93

高尔基复合体相关蛋白1抗体Vincosamide中文名：喜果苷别名：Vincoside lactam分子式：C26H30N2O8

乙酰辅酶A羧化酶1ACCα抗体Corypalmine中文名：紫堇根碱别名：分子式：C20H234