注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
硬脂酸(Standard for GC,>99%(GC))Myc-Tag (9B11) Mouse mAb2-氨基-3,5-二吡

(Standard for GC,>99.5%（GC))Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb羟基

环丁砜(标准品)Myc-Tag (71D10) Rabbit mAb溴苄

环丁砜(Standard for GC,≥99.5%(GC))Myc-Tag (9B11) Mouse mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)1,二甲基脲嘧啶

十四烷(Standard for GC,>99%(GC))Raptor (24C12) Rabbit mAb溴-2-

3,3′,5,5′-四甲基联(standard for GC,≥99.0%(GC))Raptor (24C12) Rabbit mAb5-溴-1H-吡唑[3,B]吡啶

酸三丁酯(standard for GC,>99.5%)SPAK Antibody羟基-酮

三(Standard for GC,>99.5%)DAP1 Antibody5-溴吲哚-甲

三(Standard for GC,≥99.5%(GC))SCD1 (R347) Antibody(S)-1-(2,6-二-氟基)

1,2,3,四氢萘(THN)(Standard for GC, ≥99.5% (GC))Cathepsin D Antibody吲哚酰

四(Standard for GC,>99.9(GC))Thioredoxin 1 Antibody (Human Specific)2-羟基-2-甲基-1-基-1-酮

三（TFA）(Standard for GC,≥99.5%(GC))LEF1 (C18A7) Rabbit mAb2-硝基咪唑

1,2,三(Standard for GC, ≥99.5% (GC))NUP98 (L205) Antibody噻吩甲酸

四(Standard for GC,≥99.9%(GC))PP5 Antibody3,5-二溴-氨基三氟甲氧基

酸三酯(P)(Standard for GC,>99.7%(GC))PP2A B Subunit (100C1) Rabbit mAb邻三氟甲

三四（TA）(Standard for GC)PP2A B Subunit (100C1) Rabbit mAb氧异丁酸

1,3,5-*(Standard for GC, ≥99.0% (GC))NUP98 (P671) Antibody2--5-氟烟酸

三正丁(Standard for GC,≥99.5%(GC))IQGAP1 AntibodyN-Boc-(S)-甲酸哌啶

STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)ELISA试剂盒Ly-6G/Gr-1  淋巴细胞抗原6G100 ug

Spondin-2 ELISA试剂盒LY-86/MD-1  MD-1蛋白100 ul

SPARC相关模块化钙结合蛋白2(SMOC2)ELISA试剂盒LY-96/MD-2  MD-2蛋白20 ul

SPARC相关模块化钙结合蛋白1(SMOC1)ELISA试剂盒Lysozyme  溶菌酶100 ul

SMAD3 ELISA试剂盒Lyn  膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn100 ul

SMAD2 ELISA试剂盒Phospho-Lyn (Tyr507)  膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn100 ul

SHC转化蛋白1(SHC1)ELISA试剂盒Phospho-Lyn (Tyr396)  酸化膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn100 ul

SH2携带蛋白(SHC/SLP-76)ELISA试剂盒Phospho-Lyn (Tyr497)  酸化膜相关蛋白酪氨酸激酶Lyn100 ul

Seryl- tRNA合成酶，细胞质(SARS/SERS)ELISA试剂盒LYVE-1  淋巴管内皮透明质酸受体100 ul
双歧杆菌PCR检测试剂盒厂家兔乳铁传递蛋白/乳铁蛋白(LF/LTF)ELISA试剂盒 英文名称：Rabbit Lactoferrin,LTF/LF ELISA Kit进口/分装

兔色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒英文名称：Rabbit pigment epithelium-derived factor,PEDF ELISA Kit进口/分装

兔肾素(Renin)ELISA试剂盒英文名称：Rabbit Renin ELISA Kit *

兔双氢睾酮(DHT)ELISA试剂盒 英文名称：Rabbit Dihydro testosterone,DHT ELISA Kit进口/分装

兔糖化血红蛋白A1c(A1c)ELISA试剂盒英文名称：Rabbit Glycated hemoglobin A1c,A1c ELISA Kit 进口/分装

兔纤溶酶抗纤溶酶复合物(PAP)ELISA试剂盒 英文名称：Rabbit plasmin-antiplasmin complex,PAP ELISA Kit*小鼠膀胱抗原(BTA)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠半乳糖6酯酶(Gal-6S)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠半胱酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠白血病抑制因子受体(LIFR)ELISA试剂盒      组装/原装         
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。