注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
2'-脱氧胸苷-5'-一酸二钠盐β-Amyloid (1-42 Specific) (D3E10) Rabbit mAb*基(2-基氧)硅烷

卫茅(>99%，分子生物学级)DNAJC2/MPP11 (D6B1E) Rabbit mAb三（五氟代基）硅烷

2-基膦酸(>90%,植物激素级)SignalSilence® Puma siRNA I*硫基硅烷

硝酸铁九水PAX9 (D9F1N) Rabbit mAb2，3，*基戊烷

松三糖DyLight™ 350 Phalloidin2，3，*基戊烷

聚二20000Rab11FIP1 (D9D8P) Rabbit mAb基二硅烷

对甲磺酸钠PathScan® Total Androgen Receptor Sandwich ELISA Kit基(甲基)二甲基硅烷

高酸钠一水(>97%,BR)β2-microglobulin (D8P1H) Rabbit mAb*基炔硅烷

SPDP；N-琥珀酰亚-(2-吡啶二硫代)酸酯BAF Complex Antibody Sampler Kit*基-2-炔氧基硅烷

2-氨基噻唑(>98%，BR)c-Myc (D84C12) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)基硫*基硅烷

化铈七水MRP4/ABCC4 (D1Z3W) Rabbit mAb三基硅烷

D-阿拉伯糖(标准品)SMYD3 (D2Q4V) Rabbit mAb氧基-*基硅烷

D-阿拉伯糖Sin1 (D7G1A) Rabbit mAb*基叠氮化硅

三六氨络钴;六氨基化钴Prostatic Acid Phosphatase (D3Y5P) Rabbit mAb*基硅烷化

米吐尔(>98%,BC)uPAR (D4Q5S) Rabbit mAb（*基硅烷）甲基氟代烷

盐酸吡哆SimpleChIP® Human StAR Intron 1 Primers氨甲基*基硅烷

硅油Glycolysis II Antibody Sampler Kit1-甲基金刚烷

溴化钠LGP2 (D3I3L) Rabbit mAb1-羟基金刚烷

甲状腺结合球蛋白(TBG)ELISA试剂盒Phospho-FAK (Tyr861)  酸化粘着斑激酶500 ul

甲状腺激素受体β(THRb)ELISA试剂盒Phospho-FAK (Tyr576/577)  酸化粘着斑激酶100 ul

甲状腺过氧化物酶(TPO)ELISA试剂盒Phospho-FAK (Tyr925)  酸化粘着斑激酶100 ul

甲状腺非肽激素(THAA)ELISA试剂盒Phospho-FAK (Tyr407)  酸化粘着斑激酶100 ul

甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI)ELISA试剂盒phospho-FAK (Tyr577)  酸化粘着斑激酶100 ul

甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)ELISA试剂盒FAF1  Fas相关1因子100 ul

甲状旁腺激素1受体(PTH1R)ELISA试剂盒phospho-FAK (Ser732)  酸化粘着斑激酶100 ul

甲状旁腺激素1-34(PTH 1-34)ELISA试剂盒FAK2/Pyk2  富含脯氨酸的酪氨酸激酶220 ul

甲状旁腺激素1-34(PTH 1-34)ELISA试剂盒phospho-Pyk2 (Tyr402)  酸化富含脯氨酸的酪氨酸激酶2500 ul
脑膜炎奈瑟菌通用型PCR检测试剂盒价格成纤维细胞生长因子受体3抗体Ethyl 2-(3-cya-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-1,3-thiazole-5-carboxylate中文名：别名：分子式：C14H12N2O3S

GATA结合蛋白1伴侣蛋白抗体Ethyl 2-(3-cya-4-isobutoxyphenyl)-4-methyl-5-thiazolecarboxylate中文名：别名：分子式：C18H20N2O3S

F-box蛋白21抗体Ethyl 2-(3-formyl-4-hydroxyphenyl)-4-methylthiazole-5-carboxylate中文名：别名：分子式：C14H134S

FBXO4蛋白抗体Ethyl 2-(4-hydroxyphenyl)-4-methylthiazole-5-carboxylate中文名：别名：分子式：C13H133S

前列腺素E受体4相关蛋白抗体Febuxostat中文名：非布索坦别名：分子式：C16H16N2O3S
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。