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注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。
组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
dGTP，3Naβ-氨酸乙酯盐酸盐 98%2,6-二氯苯 98%

dGTP，4NaL-精氨酸叔丁酯 98%2,6-二氯苯甲 99%

2′-DiN'-对甲苯磺酰基-L-精氨酸 98%2,6-二氟苯  98%

dIMPL-天冬氨酸-β-甲酯盐酸盐 98%2,6-二氟苯甲酰胺  97%

dITP，3NaN-乙酰-L-苯氨酸 99%2，6-二氯甲苯 99%

2-dTN-乙酰-DL-色氨酸 98%苯骈三氮唑 99%

TMPNω-(4-甲氧基-2,3,6-三磺酰基)-L-精氨酸 98%苯骈三氮唑 CP，97%

dTDPL-氨酸甲酯盐酸盐 98%D-海藻糖,无 99%

TTPN-乙酰-L-亮氨酸 98%木瓜蛋白酶 ≥3 units/mg

dTTP,4NaN-乙酰-DL-亮氨酸 98%D-(+)-海藻糖 二合物  from Saccharomyces cerevisiae, ≥99%

2′-DuD-3-(2-萘基)-氨酸 98%D-海藻糖，二 分析标准品

dUMPL-3-(2-萘基)-氨酸 97%D-海藻糖，二 用于细胞和昆虫细胞培养, ≥99%

dUTP，3Na血管紧张素I 97%D-海藻糖，二 用于植物细胞培养, ≥99%

dUTP，4NaD-氨酰-D-氨酸 99%肌酸，一 BR

BDUH-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸-OH  ≥95% (HPLC)无肌酸 98%

5-BrU精氨酰-甘氨酰-天冬氨酸 97%肌酐 99%

邻氯苯酚(标准品)Progesterone Receptor A/B (C89F7) Rabbit mAbNAGP8  干细胞转录因子NAGP8抗体

邻氯苯酚(Standard for GC,>99.5%(GC))Phospho-M-CSF Receptor (Tyr809) AntibodyNag  胚胎干细胞关键蛋白抗体

4-氯-2-胺(标准品)Phospho-M-CSF Receptor (Tyr723) (49C10) Rabbit mAbNALP6  富含亮氨酸重复结构域蛋白6抗体

敌草索(标准品)Progesterone Receptor B (C1A2) Rabbit mAbNALP4  癌/抗原58抗体

1-氯辛烷(标准品)IFN-γ (3F1E3) Mouse mAbNALP2/PAN1/PYPAF2  富含亮氨酸重复结构域蛋白2抗体

二乙烯三胺(Standard for GC,>99%(GC))Phospho-PDGF Receptor β (Tyr751) AntibodyNALP12  NALP12抗体

N,N-二胺(standard for GC,≥99.5%(GC))PDGF Receptor β AntibodyNAIP  神经细胞凋亡抑制蛋白抗体

十二烷(标准品)PDGF Receptor α AntibodyNAIF1 protein  核凋亡诱导因子蛋白1

四(≥99.5% (GC))cGAS (D3O8O) Rabbit mAb (Mouse Specific)Nadrin  神经细胞发育相关调控蛋白抗体

铋标准溶液(100mg/L,基体: 5％H3)Zap-70 (D1C10E) XP® Rabbit mAbNADPH  还原型辅酶Ⅱ抗体
刚果锥虫PCR检测试剂盒规格丝裂原活化蛋白激酶3抗体Azithromycin dihydrate中文名：阿奇霉素二物别名：分子式：C38H72N2O12

雌激素受体β 抗体8-Azaguanine中文名：8-氮杂鸟嘌呤别名：分子式：C4H4N6O

上皮特异性抗原抗体2,2'-Anhydro-5-methyluridine中文名：2,2'-O-脱-5-甲基尿嘧啶核苷别名：分子式：C10H12N2O5

内皮素-1抗体6-Benzyloxyindole中文名：6-苄氧基吲哚别名：分子式：C15H13

天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗体S-2-Benzothiazolyl2-ami-alpha-(methoxyimi)-4-thiazolethiolacetate中文名：AE活性酯别名：分子式：C13H10N4O2S3