注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
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实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
Maleic hydrazide potassium salt咪唑-4-甲酸甲酯 98%5-溴-4氯-3吲哚基β-D 半乳糖 99%

Diphenylcartazide辛二酸单甲酯 98%L-(−)-木糖 99%

Betaine HC1牛血清白蛋白，组分 V 分子生物学级烯酸 AR,>99%(GC)，包含180-200 ppm MEHQ 稳定剂

Betaine牛血清白蛋白 96%甲基烯酸烯酯, 包含50-185 ppm MEHQ稳定剂, 98%

Colchicine5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯对甲苯胺盐 ≥99% (HPLC)甲基烯酸苄基酯 98%

Demecolcine2,2'-联喹啉-4,4'-二甲酸二钠 98%二甲基烯酸1,3-丁二酯, 含200 ppm MEHQ稳定剂, 95%

Indomethacin5-溴-2'-脱氧尿苷 99%二甲基烯酸1,4-丁二酯, 含100ppm MEHQ 稳定剂, 95%

Adesine3,5-二羟基苯甲酸 97%二烯酸1,3-丁二酯, 含500 ppm 对苯二酚（HQ）稳定剂, 98%

CAMP二硫苏糖 99%甲基烯酸叔丁酯, 包含有200 ppm MEHQ阻聚剂, 99%

CAMP，Na5,5'二硫代双(2-甲酸) 98%甲基烯酸丁酯 GR,99%

5´-AMP3,5-二氯-2-羟基苯磺酸钠 99%烯酸叔丁酯 99%,含10-20 ppm MEHQ 作为稳定剂

5'-AMP，2Na 3,3'-二氨基联苯胺四盐酸盐合物 98%甲基烯酸环己酯, 包含60 - 100 ppm MEHQ（氢醌单甲）稳定剂,

5'-ADP，Na2异硫酸荧光素 96%二甲基烯酸二乙二酯 96%

5'-ATP，Na2谷胱甘肽(还原型)  98%甲基烯酸二乙基氨基乙酯, 包含100 ppm 吩噻, 99%

CytosineL-谷胱甘肽（氧化型）98%烯酸乙氧基乙氧基乙酯, >90%(GC),含1000ppmMEHQ稳定剂

Cytidine盐酸胍 分子生物学级，99.5%二烯酸二乙二酯 75%

3-氯酚(标准品)Phospho-Rpb1 CTD (Ser2) (E1Z3G) Rabbit mAb (Biotinylated)NDUFS1/NADH dehydrogenase (ubiquine) FeS protein 1 (75kD)  线粒体复合物NDUFS1蛋白抗体

氯苯标准溶液(1000μg/ml,溶剂：甲)Phospho-Met (Tyr1234/1235) AntibodyNDUFAF4  激素调节增值细胞相关蛋白抗体

3-氯-4-胺(标准品)Phospho-Met (Tyr1234/1235) AntibodyNDUFA9  NDUFA9蛋白抗体

3-氯-4-氟苯胺(标准品)ALK (D5F3®) XP® Rabbit mAb (HRP Conjugate)NDUFA8  NADH脱氢酶α家族8抗体

屈(标准品)Met (25H2) Mouse mAbNDUFA10  NADH氧化还原酶辅酶10抗体

屈标准溶液(3.58 μg/mL,基体：甲)Met (25H2) Mouse mAbNDUFA1  NADH氧化还原酶辅酶1抗体

邻氯甲苯(标准品)ARP2 AntibodyNDST1  NDST1蛋白抗体

邻甲酚(用于环境分析)ARP2 AntibodyNDRG4  抑癌基因NDRG4抗体

对甲酚(标准品)Phospho-Met (Tyr1234/1235) (3D7) Rabbit mAbNDRG3  抑癌基因NDRG3抗体

氢化钙(AR,95%)Phospho-Met (Tyr1234/1235) (3D7) Rabbit mAbNDRG2  抑癌基因NDRG2抗体
化脓隐秘菌原名PCR检测试剂盒规格人肌球蛋白轻链(MLC)ELISA试剂盒英文名称：Human Myosin light Chain，MLC ELISA Kit*

人肌球蛋白轻链激酶(MLCK)ELISA试剂盒英文名称：Human myosin light chain kinase,MLCK ELISA Kit进口/分装

人肌球蛋白重链(MHC)ELISA试剂盒 英文名称：Human myosin heavy chain,MHC ELISA Kit进口/分装

人肌酸激酶(CK)ELISA试剂盒 英文名称：Human Creatine Kinase，CK ELISA Kit*

人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)ELISA试剂盒英文名称：Human Creatine Kinase MB isoenzyme，CK-MB ELISA Kit进口/分装

人肌细胞生成素(MYOG)ELISA试剂盒英文名称：Human myogenin,MYOG ELISA Kit*小鼠抗中性粒细胞核周抗体(pANCA)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠抗中性粒/中心体抗体(ACA)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠抗增殖细胞核抗原抗体(PCNA)ELISA试剂盒      组装/原装

小鼠抗胰蛋白酶(AT)ELISA试剂盒      组装/原装         
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。