注意事项：1．基础程序；2．扩增温度和延伸温度；3．反应时间；4．循环次数；5．PCR 反应液的配制；6．PCR技术的基本原理；7．PCR的反应动力学；8．PCR扩增产物；9．PCR反应体系与反应条件。

组成及试剂配制:
1、酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。
​
实验过程：
一、试剂准备
1. DNA模板
2．对应目的基因的特异引物（在PCR反应中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制，而不能从无到有，凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA，一般20多bp，需要根据你的模板链设计。因此，扩增不同的基因需要设计不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步骤
1．在冰浴中，按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1（10pM）               2μl
引物2（10PM）              2μl
Taq酶（2U/μl）            1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl）　　　 1 μl
加ddH2O至               50 μl
视PCR仪有无热盖，不加或添加石蜡油。
2．调整好反应程序。将上述混合液稍加离心，立即置PCR仪上，执行扩增。一般：在93℃预变性3-5min，进入循环扩增阶段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循环30-35次，zui后在72℃ 保温7min。
3．结束反应，PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4．PCR的电泳检测：如在反应管中加有石蜡油，需用100μlLuFang进行抽提反应混合液，以除去石蜡油；否则，直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
１．PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
２．纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言，只要能够得到可靠的结果，纯化的方法越简单越好。
３．所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
４．PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水，采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
５．试剂都应该以大体积配制，试验一下是否满意，然后分装成仅够一次使用的量储存，从而确保实验与实验之间的连续性。
６．试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子，玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
７．PCR的样品应在冰浴上化开，并且要充分混匀。
Sodium 4-amihippurate1,2,4-*苯 Standard for GC，≥99.5% (GC)硫酸 AR,95-98%（）

Tryptamine硫代米氏酮 AR硫酸 99.999% metals basis

Tyramine hydrochloride邻苯二甲 Standard for GC, ≥99.5% (GC)发烟硫酸 AR

IDA维多利亚蓝B 高纯级，80%锑 USP, 99.0-103.0%

GPDA维多利亚蓝B Biological stain二酮  ≥99.0%(GC)

Pentagastrin二甲酚橙四钠盐 AR甲基异丁(MIBC)  99%

HBTU锌试剂 AR甲基异丁酮  for HPLC, ≥99.5%

L-Homoarginine hydrochloride锌试剂 ≥85%（HPLC）苯乙烯 99%,含10-15ppm 4-叔-丁基邻苯二酚稳定剂

Zinc Glycinate3,3'4,4'-二苯甲酮四羧酸二酐 96%合联氨  AR,80%溶液

Magnesium Glycinate1,4,5,8-萘四甲酸酐 96%胡椒 CP,99.0%（易制）

Calcium Glycinate六氟锆酸 45%溶液六偏磷酸钠 AR

3-Amibutaic acid碱式碳酸锆(IV) ≥40% ZrO2 basis5-氨基喹啉 99%

DL-3-Amiisobutyric acid偏硅酸钠，五 95%4-溴代三苯胺 97%

2-Amiisobutyric Acid零偏硅酸钠 SiO2, 44-47% 4,7-二羟基-1,10-菲罗啉 98.0%

DL-Arginine HC1偏硅酸钠，九 AR4,4′-二壬基-2,2′-联吡啶 98.0%

L-Arginine L-aspartate salt偏硅酸钠，九 CP4,4′-二壬基-2,2′-联吡啶 98.0%

2,4-二硝基氯苯标准溶液(1.00mg/ml,基体：甲)Asymmetric Dimethyl-SMARCC1/BAF155 (Arg1064) (D4F2L) Rabbit mAb (ChIP Specific)PARP (N-Terminus)  多腺苷二磷酸多聚酶抗体(N端)

标准溶液(100μg/ml,溶剂：甲)PEA-15 AntibodyPARP  多腺苷二磷酸多聚酶抗体/多聚ADP-核糖聚合酶1

2,3-二氯甲苯(标准品)Phospho-FADD (Ser194) Antibody (Human Specific)PARL  骨骼肌细胞线粒体膜蛋白PARL抗体

2,5-二氯甲苯(标准品)CD28 (CD28.2) Mouse mAb (PE Conjugate)Parkin protein/PARK2  帕金蛋白抗体

3,4-二氯苯胺(标准品)FADD Antibody (Human Specific)PARG1/Rho GTPase activating protein 29  Rho GTP酶激活蛋白29抗体

3,3-二氯联苯胺(标准品)FADD Antibody (Human Specific)PARD6B  缺陷性分配同源物β抗体

直接蓝6(标准品)Pyruvate Dehydrogenase AntibodyPAR6  缺陷性分配同源物α抗体

分散橙37(标准品)GLUL (D2O3F) Rabbit mAb (IHC Formulated)PAR4  蛋白酶激活受体4抗体

邻苯二甲酸二苯酯(标准品)INCENP (A841) AntibodyPAR4  蛋白酶活化受体4抗体

二甲基二氯化锡(标准品)Lck (73A5) Rabbit mAbPAR3  非典型蛋白激酶C特定相互作用蛋白抗体
瑟氏泰勒虫PCR检测试剂盒价格4-Chloro-3,5-dinitrobenzotrifluoride,99%通用试剂　5G

3,5-Dinitrobenzotrifluoride,99%通用试剂　5G

5-Chloro-2-nitrobenzotrifluoride,99%通用试剂　5G

4-Chloro-3-nitrobenzotrifluoride,97%通用试剂　25G

3-Nitrobenzotrifluoride,97%通用试剂　25G

2,4-Dichlorobenzotrifluoride,98%通用试剂　25G

2-Chlorobenzotrifluoride,99%通用试剂　100G

1-Bromo-2,3-dimethylbenzene,99%通用试剂　5G

1-Iodo-3-nitrobenzene,99%通用试剂　25G

1-Bromo-4-ethylbenzene,97%通用试剂　10G

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Mesityl Iodide,98%通用试剂　5G

2-Fluoroiodobenzene,99%通用试剂　5G

1,4-Bis(trifluoromethyl)benzene,98%通用试剂　5G
检测步骤：
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX)，冰上融化并振荡混匀后，10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照)，每个测试反应体系配制如下表：
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
（1） 计算好各试剂的使用量，加入一适当体积洁净离心管中，充分混匀，10000rpm离心10s，向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液，向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL，10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸时收集荧光信号。报告基团：设置为FAM。淬灭基团：NONE，请勿选择ROX参比荧光。