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突变泰勒虫PCR检测试剂盒厂家
参考价:

型号:50T

更新时间:2021-03-13  |  阅读:528

详情介绍

组成及试剂配制:
1、酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。

 产品名称

 突变泰勒虫PCR检测试剂盒厂家

 英文名称

 Theileria mutansPCR

 货号

 LZP7382

实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
三、注意事项
1.PCR反应应该在一个没有DNA污染的干净环境中进行设立一个的PCR实验室。
2.纯化模板所选用的方法对污染的风险有极大影响。一般而言,只要能够得到可靠的结果,纯化的方法越简单越好。
3.所有试剂都应该没有核酸和核酸酶的污染。操作过程中均应戴手套。
4.PCR试剂配制应使用zui高质量的新鲜双蒸水,采用0.22μm滤膜过滤除菌或高压灭菌。
5.试剂都应该以大体积配制,试验一下是否满意,然后分装成仅够一次使用的量储存,从而确保实验与实验之间的连续性。
6.试剂或样品准备过程中都要使用一次性灭菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿应洗涤干净并高压灭菌。
7.PCR的样品应在冰浴上化开,并且要充分混匀。检测步骤:
一、 试剂的准备
从试剂盒中取出荧光PCR反应液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振荡混匀后,10000rpm离心10s。
设所需要的PCR反应管管数为N(N=样本数+1管阴性对照+1管阳性对照),每个测试反应体系配制如下表:
试剂 每个反应加入的量 N个反应加入的量
荧光PCR反应液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
总量 15 µL N×15µL
1) 计算好各试剂的使用量,加入一适当体积洁净离心管中,充分混匀,10000rpm离心10s,向设定的N个PCR反应管中分别加入15μL荧光PCR反应液,向每管中加入处理后样品或阴性对照(NTC)和阳性对照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬时离心10秒。
7.2 qPCR反应条件
将各反应管放入定量PCR仪器的反应槽内。
推荐循环条件:
1循环 50℃ for 2 min
预变性 1循环 95℃ for 10 min
PCR扩增 40循环 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸时收集荧光信号。报告基团:设置为FAM。淬灭基团:NONE,请勿选择ROX参比荧光。
Hippuric Acid聚二乙烯苯多孔小球GDX-201 60-80目1,2-二(二苯基膦基)乙烷二氯化钯(II)  Pd  18.5%

Hippuryl-L-phenylalanine聚二乙烯苯多孔小球GDX-301 80-100目二(三环己基膦)亚苄基二氯化钌 Ru 12.3%

Glycylglycine聚二乙烯苯多孔小球GDX-501 60-80目四(三苯基膦)氢化铑(I) Rh 8.9% min

Glycine methyl ester HCL聚二乙烯苯多孔小球GDX-502 40-60目1,3-二乙烯基-1,1,3,3-四甲基二硅氧烷铂(0) Pt, ~2%

Glycine ethyl ester HC1聚二乙烯苯多孔小球GDX-502 60-80目醋酸钯 AR,Pd 46.0 - 48.0 %

phosphatidylserine聚二乙烯苯多孔小球GDX-502 80-100目二(乙酰酮)钯(II) Pd 34.9%

EACA玫瑰红酸 Indicator氢氧化钯 20% Pd

Complex ami acid玫瑰红酸 AR氢氧化钯 10% Pd

BAEE半二甲酚橙 AR铂炭催化剂 Pt 5%

BAA苏丹红Ⅲ AR钯硫酸钡 5% Pd basis

BANI苏丹红Ⅲ CP钯硫酸钡 10% Pd basis

BTEE苏丹红Ⅲ 分析标准品,≥96.0% (HPLC),用于食品分析钯碳 5%Pd

TAME苏丹Ⅳ AR钯碳 10%Pd

TLCK苏丹Ⅳ 分析标准品,≥96.0% (HPLC),用于食品分析醋酸铑(II)二聚体 RH:43.0%-46.6%

TPCK硅钨酸,二十六 AR铑黑 99.9% metals basis

BOC-Leu-Gly-Arg•Pna•HC1苏丹II Biological stain氧化铑,无 99.8% metals basis,Rh 81%

间二甲苯标准溶液(1000μg/ml,溶剂:二硫化碳)AMPKα2 AntibodyPCDH11X  原钙粘附蛋白11X抗体

对特辛基苯酚(POP)(标准品)AMPKα2 AntibodyPCDH1  原钙粘附蛋白1抗体

磺胺甲二唑(标准品)ISG15 (22D2) Rabbit mAbPCB  酮酸羧化酶抗体

二苯砜(标准品)ISG15 (22D2) Rabbit mAbPCANAP2/Prostein  前列腺癌相关蛋白2抗体

2,3-二氯-1,4-萘醌(标准品)CUL3 AntibodyP-cadherin  P-钙粘附分子抗体

邻苯二甲酸二酯(标准品)Glucagon AntibodyPBR/DBI/TSPO  外周苯二氮受体抗体

邻苯二甲酸二异辛酯(标准品)Numb (C44B4) Rabbit mAbPBOV1  前列腺癌和癌高表达蛋白抗体

(标准品)Bcl-xL AntibodyPBLD/MAWBP  MAWD结合蛋白抗体

标准溶液(10μg/ml,u=5~3%,酮)MESDC2 (C22F5) Rabbit mAbPBK/TOPK  PDZ连接激酶/T-LAK细胞源蛋白激酶抗体

二磷标准溶液(100μg/ml,u=6~4%,酮)MMP-9 (D6O3H) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)PBEF1(CT)  内脂素/内脏脂肪素(C端抗体)
突变泰勒虫PCR检测试剂盒厂家Isopropenyl acetate,≥99%通用试剂 100ML

Diphenylphosphine,98%表面活性剂 5G

4-Hydroxybutaic acid lactone,≥98%通用试剂 100G

Diphenyl(2,4,6-trimethylbenzoyl)phosph...表面活性剂 5G

(S)-(+)-1,1'-Binaphthyl-2,2'-diyl Hydr...表面活性剂 250MG

Diethyl sulfate,98%通用试剂 100G

Methyl trichlroracetate,99%通用试剂 50G

Methyltriphenylphosphonium iodide,97%表面活性剂 25G

Ethyl trichloroacetate,97%通用试剂 25G

4,6-Bis(diphenylphosphi)phexazine,...表面活性剂 250MG

4-Hydroxybutaic acid lactone,≥99%通用试剂 25G

Methyl 4-hydroxybenzoate,≥99%通用试剂 50G

Methyl 4-amibenzoate,≥98%通用试剂 25G

Xantphos,98%表面活性剂 1G

Dipentyl phthalate,≥99.0%通用试剂 25ML

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